CAJ | 학술논문

目的:探讨热休克蛋白(HSP)是否参与PI3K/Akt信号通路介导的H2O2预处理的抗细胞凋亡作用.方法:利用PC12细胞建立H2O2预处理对抗高浓度H2O2诱导细胞凋亡的实验模型,分组如下:(1)空白对照组;(2) 损伤组;(3)预处理+损伤组;(4)LY294002+预处理+损伤组;(5) LY294002组;(6) quercetin+预处理+损伤组;(7) 17-AAG+预处理+损伤组;(8) 溶剂对照组.应用Hoechst 33258染色观察细胞凋亡形态,碘化丙啶(PI)染色流式细胞术检测细胞凋亡率,比色法测定caspase-3的活性,免疫印迹法(Western blotting)测定HSP的表达水平.结果:100 μmol/L H2O2预处理PC12细胞90 min可显著地抑制300 μmol/L H2O2引起的细胞凋亡,使caspase-3的活性降低,同时上调HSP70和HSP90的表达.HSP70和HSP90的抑制剂quercetin和17-AAG拮抗H2O2预处理的抗细胞凋亡作用.PI3K抑制剂LY294002不仅拮抗了H2O2预处理抗细胞凋亡的作用,并且抑制H2O2预处理对HSP70和HSP90的表达上调.结论:PI3K/Akt通路、HSP70和HSP90均参与H2O2预处理诱导的细胞保护作用.并且HSP70和HSP90参与PI3K/Akt信号通路介导H2O2预处理的抗细胞凋亡作用.
목적:탐토열휴극단백(HSP)시부삼여PI3K/Akt신호통로개도적H2O2예처리적항세포조망작용.방법:이용PC12세포건립H2O2예처리대항고농도H2O2유도세포조망적실험모형,분조여하:(1)공백대조조;(2) 손상조;(3)예처리+손상조;(4)LY294002+예처리+손상조;(5) LY294002조;(6) quercetin+예처리+손상조;(7) 17-AAG+예처리+손상조;(8) 용제대조조.응용Hoechst 33258염색관찰세포조망형태,전화병정(PI)염색류식세포술검측세포조망솔,비색법측정caspase-3적활성,면역인적법(Western blotting)측정HSP적표체수평.결과:100 μmol/L H2O2예처리PC12세포90 min가현저지억제300 μmol/L H2O2인기적세포조망,사caspase-3적활성강저,동시상조HSP70화HSP90적표체.HSP70화HSP90적억제제quercetin화17-AAG길항H2O2예처리적항세포조망작용.PI3K억제제LY294002불부길항료H2O2예처리항세포조망적작용,병차억제H2O2예처리대HSP70화HSP90적표체상조.결론:PI3K/Akt통로、HSP70화HSP90균삼여H2O2예처리유도적세포보호작용.병차HSP70화HSP90삼여PI3K/Akt신호통로개도H2O2예처리적항세포조망작용.