CAJ | 학술논문

本研究根据其他鱼类MHC-Ⅱα基因的保守序列设计兼并引物,运用同源克隆和末端快速扩增方法扩增了军曹鱼MHC-Ⅱα基因的全长cDNA序列,并对cDNA及其氨基酸序列进行了分析,比较了军曹鱼和其他物种的MHC-Ⅱα氨基酸序列的差异,分析了军曹鱼MHC-Ⅱα基因的组织分布及经LPS刺激后头肾组织中MHC-Ⅱα基因的表达变化.结果表明,军曹鱼MHC-Ⅱα cDNA全长998 bp,包括53 bp的5'末端非编码区(5'UTR)、234 bp的3'末端非编码区(3'UTR)及711 bp的开放阅读框(ORF),编码236个氮基酸,其蛋白质分子质量约为25.94 ku,等电点为4.39;军曹鱼MHC-Ⅱα蛋白质序列具有一些重要的特征,包括前导肽、α1、α2、CP/TM/CYT区和保守的半胱氨酸等;军曹鱼MHC-Ⅱα与鼠、人及其它鱼类的氨基酸同源性在25.0%～69.5%之间.Real-time PCR检测结果显示,MHC-Ⅱα基因在正常军曹鱼组织中均有表达,但其表达量在各种组织中存在差异,其中较强表达于头肾、鳃,中等程度表达于脾脏、肠,在心脏、脑、肌肉中表达较弱;经LPS刺激后,头肾中MHC-Ⅱα基因表达下调.
본연구근거기타어류MHC-Ⅱα기인적보수서렬설계겸병인물,운용동원극륭화말단쾌속확증방법확증료군조어MHC-Ⅱα기인적전장cDNA서렬,병대cDNA급기안기산서렬진행료분석,비교료군조어화기타물충적MHC-Ⅱα안기산서렬적차이,분석료군조어MHC-Ⅱα기인적조직분포급경LPS자격후두신조직중MHC-Ⅱα기인적표체변화.결과표명,군조어MHC-Ⅱα cDNA전장998 bp,포괄53 bp적5'말단비편마구(5'UTR)、234 bp적3'말단비편마구(3'UTR)급711 bp적개방열독광(ORF),편마236개담기산,기단백질분자질량약위25.94 ku,등전점위4.39;군조어MHC-Ⅱα단백질서렬구유일사중요적특정,포괄전도태、α1、α2、CP/TM/CYT구화보수적반광안산등;군조어MHC-Ⅱα여서、인급기타어류적안기산동원성재25.0%～69.5%지간.Real-time PCR검측결과현시,MHC-Ⅱα기인재정상군조어조직중균유표체,단기표체량재각충조직중존재차이,기중교강표체우두신、새,중등정도표체우비장、장,재심장、뇌、기육중표체교약;경LPS자격후,두신중MHC-Ⅱα기인표체하조.