重庆医科大学学报
重慶醫科大學學報
중경의과대학학보
UNIVERSITATIS SCIENTIAE MEDICINAE CHONGQING
2010年
8期
1133-1137
,共5页
刘帅%姜蓉%郗强%杨戎%张文文
劉帥%薑蓉%郗彊%楊戎%張文文
류수%강용%치강%양융%장문문
TACE%小鼠体外着床%子宫内膜上皮细胞%原代培养
TACE%小鼠體外著床%子宮內膜上皮細胞%原代培養
TACE%소서체외착상%자궁내막상피세포%원대배양
目的:通过检测肿瘤坏死因子α转换酶(Tumor necrosis factor α convening enzyme,TACE)在小鼠子宫内膜上皮细胞中的表达及其在体外着床模型中对胚泡粘附的影响,初步探讨TACE在小鼠生殖中的作用以及其与胚胎着床的关系.方法:体外培养孕4d(d4)小鼠子宫内膜上皮细胞和胚泡,构建胚泡体外着床模型;通过细胞免疫组化鉴定小鼠子宫内膜上皮细胞;运用RT-PCR和细胞免疫组化分别检测小鼠子宫内膜上皮细胞中TACE mRNA和蛋白的表达;向体外着床模型中添加不同浓度的TACE抗体,观察对胚泡体外着床的影响,并用细胞免疫化学检测抗体干预后各培养体系中TACE蛋白质的表达情况.结果:原代培养小鼠子宫内膜上皮细胞生长旺盛,鉴定结果显示:上皮细胞对角蛋白抗体有棕黄色阳性表达,对波形蛋白抗体为阴性表达.PCR结果显示TACE mRNA在共培养体系中有高表达,免疫组化结果与RT-PCR结果相一致;小鼠胚泡体外共培养具有较高的粘附率,添加TACE抗体后胚泡帖附率均显著低于对照组帖附率(P<0.05),且随着抗体浓度的降低胚泡粘附率随之升高,免疫化学检测结果也显示随着抗体浓度的降低TACE的表达量随之升高.结论:TACE可能参与了胚泡着床过程,有利于小鼠胚胎粘附、扩展,为胚胎的着床做准备.
目的:通過檢測腫瘤壞死因子α轉換酶(Tumor necrosis factor α convening enzyme,TACE)在小鼠子宮內膜上皮細胞中的錶達及其在體外著床模型中對胚泡粘附的影響,初步探討TACE在小鼠生殖中的作用以及其與胚胎著床的關繫.方法:體外培養孕4d(d4)小鼠子宮內膜上皮細胞和胚泡,構建胚泡體外著床模型;通過細胞免疫組化鑒定小鼠子宮內膜上皮細胞;運用RT-PCR和細胞免疫組化分彆檢測小鼠子宮內膜上皮細胞中TACE mRNA和蛋白的錶達;嚮體外著床模型中添加不同濃度的TACE抗體,觀察對胚泡體外著床的影響,併用細胞免疫化學檢測抗體榦預後各培養體繫中TACE蛋白質的錶達情況.結果:原代培養小鼠子宮內膜上皮細胞生長旺盛,鑒定結果顯示:上皮細胞對角蛋白抗體有棕黃色暘性錶達,對波形蛋白抗體為陰性錶達.PCR結果顯示TACE mRNA在共培養體繫中有高錶達,免疫組化結果與RT-PCR結果相一緻;小鼠胚泡體外共培養具有較高的粘附率,添加TACE抗體後胚泡帖附率均顯著低于對照組帖附率(P<0.05),且隨著抗體濃度的降低胚泡粘附率隨之升高,免疫化學檢測結果也顯示隨著抗體濃度的降低TACE的錶達量隨之升高.結論:TACE可能參與瞭胚泡著床過程,有利于小鼠胚胎粘附、擴展,為胚胎的著床做準備.
목적:통과검측종류배사인자α전환매(Tumor necrosis factor α convening enzyme,TACE)재소서자궁내막상피세포중적표체급기재체외착상모형중대배포점부적영향,초보탐토TACE재소서생식중적작용이급기여배태착상적관계.방법:체외배양잉4d(d4)소서자궁내막상피세포화배포,구건배포체외착상모형;통과세포면역조화감정소서자궁내막상피세포;운용RT-PCR화세포면역조화분별검측소서자궁내막상피세포중TACE mRNA화단백적표체;향체외착상모형중첨가불동농도적TACE항체,관찰대배포체외착상적영향,병용세포면역화학검측항체간예후각배양체계중TACE단백질적표체정황.결과:원대배양소서자궁내막상피세포생장왕성,감정결과현시:상피세포대각단백항체유종황색양성표체,대파형단백항체위음성표체.PCR결과현시TACE mRNA재공배양체계중유고표체,면역조화결과여RT-PCR결과상일치;소서배포체외공배양구유교고적점부솔,첨가TACE항체후배포첩부솔균현저저우대조조첩부솔(P<0.05),차수착항체농도적강저배포점부솔수지승고,면역화학검측결과야현시수착항체농도적강저TACE적표체량수지승고.결론:TACE가능삼여료배포착상과정,유리우소서배태점부、확전,위배태적착상주준비.