中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2008年
11期
969-971
,共3页
张光明%刘馨%张永欣%徐婧雯%洪超%孙茂盛
張光明%劉馨%張永訢%徐婧雯%洪超%孫茂盛
장광명%류형%장영흔%서청문%홍초%손무성
轮状病毒%人二倍体细胞%蚀斑筛选%适应性
輪狀病毒%人二倍體細胞%蝕斑篩選%適應性
륜상병독%인이배체세포%식반사선%괄응성
目的 探讨轮状病毒P[2]G3株在人二倍体细胞KMB17上的适应性.方法 轮状病毒P[2]G3株在猴肾细胞MA104上经蚀斑筛选纯化后,得到的克隆以不同MOI接种至人二倍体细胞KMB17上.用微量滴定法与蚀斑法平行检测病毒滴度,用免疫荧光法检测病毒的增殖情况,最后进行病毒基因组稳定性检测.结果 经MA104细胞培养的轮状病毒P[2]G3株在人二倍体细胞KMB17上可产生明显的细胞病变(CPE),但病变出现的时间随病毒传代次数的增加而延迟,抗原性也逐渐减弱.通过蚀斑筛选纯化得到的克隆病毒,可在KMB17细胞上稳定地增殖.以0.05 MOI病毒量接种可产生稳定的CPE,时间为72～96 h.连续传代至第10代,病毒滴度达105.5PFU/ml,病毒基因组稳定.结论 轮状病毒P[2]G3株在人二倍体细胞KMB17上表现出毒力及增殖能力的衰退;经蚀斑筛选纯化可获得毒力较强的病毒株,并在KMB17细胞中稳定复制、增殖.
目的 探討輪狀病毒P[2]G3株在人二倍體細胞KMB17上的適應性.方法 輪狀病毒P[2]G3株在猴腎細胞MA104上經蝕斑篩選純化後,得到的剋隆以不同MOI接種至人二倍體細胞KMB17上.用微量滴定法與蝕斑法平行檢測病毒滴度,用免疫熒光法檢測病毒的增殖情況,最後進行病毒基因組穩定性檢測.結果 經MA104細胞培養的輪狀病毒P[2]G3株在人二倍體細胞KMB17上可產生明顯的細胞病變(CPE),但病變齣現的時間隨病毒傳代次數的增加而延遲,抗原性也逐漸減弱.通過蝕斑篩選純化得到的剋隆病毒,可在KMB17細胞上穩定地增殖.以0.05 MOI病毒量接種可產生穩定的CPE,時間為72～96 h.連續傳代至第10代,病毒滴度達105.5PFU/ml,病毒基因組穩定.結論 輪狀病毒P[2]G3株在人二倍體細胞KMB17上錶現齣毒力及增殖能力的衰退;經蝕斑篩選純化可穫得毒力較彊的病毒株,併在KMB17細胞中穩定複製、增殖.
목적 탐토륜상병독P[2]G3주재인이배체세포KMB17상적괄응성.방법 륜상병독P[2]G3주재후신세포MA104상경식반사선순화후,득도적극륭이불동MOI접충지인이배체세포KMB17상.용미량적정법여식반법평행검측병독적도,용면역형광법검측병독적증식정황,최후진행병독기인조은정성검측.결과 경MA104세포배양적륜상병독P[2]G3주재인이배체세포KMB17상가산생명현적세포병변(CPE),단병변출현적시간수병독전대차수적증가이연지,항원성야축점감약.통과식반사선순화득도적극륭병독,가재KMB17세포상은정지증식.이0.05 MOI병독량접충가산생은정적CPE,시간위72～96 h.련속전대지제10대,병독적도체105.5PFU/ml,병독기인조은정.결론 륜상병독P[2]G3주재인이배체세포KMB17상표현출독력급증식능력적쇠퇴;경식반사선순화가획득독력교강적병독주,병재KMB17세포중은정복제、증식.
