环境科学学报
環境科學學報
배경과학학보
ACTA SCIENTIAE CIRCUMSTANTIAE
2008年
11期
2200-2205
,共6页
宋琳玲%曾光明%陈耀宁%范长征%余震%杨恋
宋琳玲%曾光明%陳耀寧%範長徵%餘震%楊戀
송림령%증광명%진요저%범장정%여진%양련
固态发酵%DNA的提取%PCR%DGGE
固態髮酵%DNA的提取%PCR%DGGE
고태발효%DNA적제취%PCR%DGGE
为了分析固态发酵过程中微生物群落的多样性及演替情况,对比研究了从固态发酵中提取细菌和真菌DNA的3种方法--溶壁酶法、超声波法、液氮研磨+CTAB法.使用紫外分光光度计测定了由不同提取方法得到的DNA的产量与纯度;使用细菌16S rDNA基因通用引物(341F和907R)和真菌18S rDNA基因通用引物(NU-SSU-0817和NU-SSU-119)对DNA进行了PCR扩增;采用DGGE(变性梯度凝胶电泳)法对固态发酵中细菌和真菌的多样性进行了分析.结果显示,3种方法得到的粗提和纯化DNA长度均约为23 kb;细菌和真菌PCR产物长度分别约为586 bp和422 bp.细菌和真菌PCR产物的DGGE分析表明,3种方法提取的DNA所反映的微生物多样性比较一致;但紫外分光光度计测定结果表明溶壁酶法提取固态发酵中微生物总DNA产量最高,超声波法次之,液氮研磨+CTAB法最低.
為瞭分析固態髮酵過程中微生物群落的多樣性及縯替情況,對比研究瞭從固態髮酵中提取細菌和真菌DNA的3種方法--溶壁酶法、超聲波法、液氮研磨+CTAB法.使用紫外分光光度計測定瞭由不同提取方法得到的DNA的產量與純度;使用細菌16S rDNA基因通用引物(341F和907R)和真菌18S rDNA基因通用引物(NU-SSU-0817和NU-SSU-119)對DNA進行瞭PCR擴增;採用DGGE(變性梯度凝膠電泳)法對固態髮酵中細菌和真菌的多樣性進行瞭分析.結果顯示,3種方法得到的粗提和純化DNA長度均約為23 kb;細菌和真菌PCR產物長度分彆約為586 bp和422 bp.細菌和真菌PCR產物的DGGE分析錶明,3種方法提取的DNA所反映的微生物多樣性比較一緻;但紫外分光光度計測定結果錶明溶壁酶法提取固態髮酵中微生物總DNA產量最高,超聲波法次之,液氮研磨+CTAB法最低.
위료분석고태발효과정중미생물군락적다양성급연체정황,대비연구료종고태발효중제취세균화진균DNA적3충방법--용벽매법、초성파법、액담연마+CTAB법.사용자외분광광도계측정료유불동제취방법득도적DNA적산량여순도;사용세균16S rDNA기인통용인물(341F화907R)화진균18S rDNA기인통용인물(NU-SSU-0817화NU-SSU-119)대DNA진행료PCR확증;채용DGGE(변성제도응효전영)법대고태발효중세균화진균적다양성진행료분석.결과현시,3충방법득도적조제화순화DNA장도균약위23 kb;세균화진균PCR산물장도분별약위586 bp화422 bp.세균화진균PCR산물적DGGE분석표명,3충방법제취적DNA소반영적미생물다양성비교일치;단자외분광광도계측정결과표명용벽매법제취고태발효중미생물총DNA산량최고,초성파법차지,액담연마+CTAB법최저.
