安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2008年
26期
11251-11252
,共2页
绿色荧光蛋白(gfp)基因%BAG蛋白%植物表达载体%根癌农杆菌
綠色熒光蛋白(gfp)基因%BAG蛋白%植物錶達載體%根癌農桿菌
록색형광단백(gfp)기인%BAG단백%식물표체재체%근암농간균
[目的]构建含绿色荧光蛋白(gfp)基因的植物重组表达载体pB1121-GFP-62390和pB1121-GFP-51780.[方法]用PCR方法扩增psmGFP的GFP片段,BamH I和Sacl双酶切PCR产物,同时用BarnH I和SacI双酶切pB1121.从琼脂糖凝胶中回收纯化pB1121的大片段,经连接、转化、鉴定出改造后的质粒.[结果]用PCR方法扩增得到长度为740 bp的增强型的绿色荧光蛋白基因片段,克隆入pB1121表达载体后,获得了新的重组质粒pB1121-GFP.分别将编码拟南芥BAG7、BACA蛋白的基因At5g62390和At3g51780通过PCR方法扩增后,克隆入pB1121-GFP,构建了用于超量表达BAG蛋白基因的GFP融合蛋白双元表达载体pB1121-GFP-62390和pB1121-GFP-51780.利用细胞感受态法将该植物表达载体分别导入根癌农杆菌GV3101中.[结论]为进一步研究BAG蛋白在拟南芥抗性胁迫中的功能及其在细胞内的动态分布奠定了基础.
[目的]構建含綠色熒光蛋白(gfp)基因的植物重組錶達載體pB1121-GFP-62390和pB1121-GFP-51780.[方法]用PCR方法擴增psmGFP的GFP片段,BamH I和Sacl雙酶切PCR產物,同時用BarnH I和SacI雙酶切pB1121.從瓊脂糖凝膠中迴收純化pB1121的大片段,經連接、轉化、鑒定齣改造後的質粒.[結果]用PCR方法擴增得到長度為740 bp的增彊型的綠色熒光蛋白基因片段,剋隆入pB1121錶達載體後,穫得瞭新的重組質粒pB1121-GFP.分彆將編碼擬南芥BAG7、BACA蛋白的基因At5g62390和At3g51780通過PCR方法擴增後,剋隆入pB1121-GFP,構建瞭用于超量錶達BAG蛋白基因的GFP融閤蛋白雙元錶達載體pB1121-GFP-62390和pB1121-GFP-51780.利用細胞感受態法將該植物錶達載體分彆導入根癌農桿菌GV3101中.[結論]為進一步研究BAG蛋白在擬南芥抗性脅迫中的功能及其在細胞內的動態分佈奠定瞭基礎.
[목적]구건함록색형광단백(gfp)기인적식물중조표체재체pB1121-GFP-62390화pB1121-GFP-51780.[방법]용PCR방법확증psmGFP적GFP편단,BamH I화Sacl쌍매절PCR산물,동시용BarnH I화SacI쌍매절pB1121.종경지당응효중회수순화pB1121적대편단,경련접、전화、감정출개조후적질립.[결과]용PCR방법확증득도장도위740 bp적증강형적록색형광단백기인편단,극륭입pB1121표체재체후,획득료신적중조질립pB1121-GFP.분별장편마의남개BAG7、BACA단백적기인At5g62390화At3g51780통과PCR방법확증후,극륭입pB1121-GFP,구건료용우초량표체BAG단백기인적GFP융합단백쌍원표체재체pB1121-GFP-62390화pB1121-GFP-51780.이용세포감수태법장해식물표체재체분별도입근암농간균GV3101중.[결론]위진일보연구BAG단백재의남개항성협박중적공능급기재세포내적동태분포전정료기출.
