药学学报
藥學學報
약학학보
ACTA PHARMACEUTICA SINICA
2008年
4期
421-426
,共6页
杨金玲%肖薇%何惠霞%朱慧新%王淑芳%程克棣%朱平
楊金玲%肖薇%何惠霞%硃慧新%王淑芳%程剋棣%硃平
양금령%초미%하혜하%주혜신%왕숙방%정극체%주평
蝙蝠蛾拟青霉%冬虫夏草%中国被毛孢%rDNA-ITS区%系统发育分析
蝙蝠蛾擬青黴%鼕蟲夏草%中國被毛孢%rDNA-ITS區%繫統髮育分析
편복아의청매%동충하초%중국피모포%rDNA-ITS구%계통발육분석
以5月和6月两个不同时段采集的分别产于青海省化隆县和四川省康定县的冬虫夏草(Cordyceps sinensis)新鲜子实体为材料,采用分子生物学方法,以rDNA-ITS序列为分子标记,对蝙蝠蛾拟青霉(Paecilomyces hepiali)与冬虫夏草之间的关系进行了探讨.以真菌通用引物ITS1/ITS4分别对蝙蝠蛾拟青霉及冬虫夏草子座和僵虫基因组DNA进行PCR扩增,获得的片段克隆到pMD18-T Vector上进行测序,结果表明,随机挑取的46个克隆与某些已在GenBank中注册的中国被毛孢(Hirsutella sinensis)或冬虫夏草的rDNA-ITS序列的一致性均在99%以上.但与蝙蝠蛾拟青霉的rDNA-ITS序列的一致性约为72%.根据蝙蝠蛾拟青霉的rDNA-ITS序列设计了两对特异引物,分别以不同产地及不同生长时期共4个批次的冬虫夏草子座和僵虫基因组DNA为模板,进行PCR及巢式PCR扩增,均得到了相应片段,该片段与蝙蝠蛾拟青霉的rDNA-ITS序列具有100%的一致性.在GenBank中注册号为AB067740的另一个标明为冬虫夏草的rDNA-ITS序列与注册号为AJ309353的中国被毛孢的rDNA-ITS序列一致性仅为87.3%,但根据AB067740序列设计特异引物,也从冬虫夏草基因组DNA中扩增到其相应序列.研究结果表明,在天然冬虫夏草中除了中国被毛孢之外,还普遍存在着蝙蝠蛾拟青霉等内寄生菌.
以5月和6月兩箇不同時段採集的分彆產于青海省化隆縣和四川省康定縣的鼕蟲夏草(Cordyceps sinensis)新鮮子實體為材料,採用分子生物學方法,以rDNA-ITS序列為分子標記,對蝙蝠蛾擬青黴(Paecilomyces hepiali)與鼕蟲夏草之間的關繫進行瞭探討.以真菌通用引物ITS1/ITS4分彆對蝙蝠蛾擬青黴及鼕蟲夏草子座和僵蟲基因組DNA進行PCR擴增,穫得的片段剋隆到pMD18-T Vector上進行測序,結果錶明,隨機挑取的46箇剋隆與某些已在GenBank中註冊的中國被毛孢(Hirsutella sinensis)或鼕蟲夏草的rDNA-ITS序列的一緻性均在99%以上.但與蝙蝠蛾擬青黴的rDNA-ITS序列的一緻性約為72%.根據蝙蝠蛾擬青黴的rDNA-ITS序列設計瞭兩對特異引物,分彆以不同產地及不同生長時期共4箇批次的鼕蟲夏草子座和僵蟲基因組DNA為模闆,進行PCR及巢式PCR擴增,均得到瞭相應片段,該片段與蝙蝠蛾擬青黴的rDNA-ITS序列具有100%的一緻性.在GenBank中註冊號為AB067740的另一箇標明為鼕蟲夏草的rDNA-ITS序列與註冊號為AJ309353的中國被毛孢的rDNA-ITS序列一緻性僅為87.3%,但根據AB067740序列設計特異引物,也從鼕蟲夏草基因組DNA中擴增到其相應序列.研究結果錶明,在天然鼕蟲夏草中除瞭中國被毛孢之外,還普遍存在著蝙蝠蛾擬青黴等內寄生菌.
이5월화6월량개불동시단채집적분별산우청해성화륭현화사천성강정현적동충하초(Cordyceps sinensis)신선자실체위재료,채용분자생물학방법,이rDNA-ITS서렬위분자표기,대편복아의청매(Paecilomyces hepiali)여동충하초지간적관계진행료탐토.이진균통용인물ITS1/ITS4분별대편복아의청매급동충하초자좌화강충기인조DNA진행PCR확증,획득적편단극륭도pMD18-T Vector상진행측서,결과표명,수궤도취적46개극륭여모사이재GenBank중주책적중국피모포(Hirsutella sinensis)혹동충하초적rDNA-ITS서렬적일치성균재99%이상.단여편복아의청매적rDNA-ITS서렬적일치성약위72%.근거편복아의청매적rDNA-ITS서렬설계료량대특이인물,분별이불동산지급불동생장시기공4개비차적동충하초자좌화강충기인조DNA위모판,진행PCR급소식PCR확증,균득도료상응편단,해편단여편복아의청매적rDNA-ITS서렬구유100%적일치성.재GenBank중주책호위AB067740적령일개표명위동충하초적rDNA-ITS서렬여주책호위AJ309353적중국피모포적rDNA-ITS서렬일치성부위87.3%,단근거AB067740서렬설계특이인물,야종동충하초기인조DNA중확증도기상응서렬.연구결과표명,재천연동충하초중제료중국피모포지외,환보편존재착편복아의청매등내기생균.