HIV-1 p15(Gag)基因的克隆、蛋白表达及抗体制备
HIV-1 p15(Gag)기인적극륭、단백표체급항체제비
Cloning, expression, and antibody preparation of HIV-1 p15(Gag)
  • 万方数据
    免疫学杂志 면역학잡지
    IMMUNOLOGICAL JOURNAL
    2008年 3期 352-355 ,共4页

    柳发勇%刘朝奇%史继静%杨凡%余枫华%杨春秀%韩莉%任东明%韩钰

    류발용%류조기%사계정%양범%여풍화%양춘수%한리%임동명%한옥

    HIV-1p15(Gag)基因%原核表达%免疫原性%多克隆抗体 HIV-1p15(Gag)基因%原覈錶達%免疫原性%多剋隆抗體
    HIV-1p15(Gag)기인%원핵표체%면역원성%다극륭항체
    目的 为了研究HIV-1 p15(Gag)的生物学活性,制备HIV-1 p15(Gag)蛋白及其特异性抗体.方法 用PCR的方法扩增编码p15(Gag)基因序列,将其克隆到原核表达载体pET28a(+)中表达HIV-1 p15蛋白,分别用His抗体和HIV阳性血清做western blot鉴定目的 蛋白.以纯化目的 蛋白为抗原免疫日本大耳白兔,制备多克隆抗体.通过酶联免疫吸附实验(ELISA),免疫细胞化学法检测抗体滴度及其特异性.结果 原核表达载体pET28 a(+)-p15(Gag)成功构建,可在大肠杆菌BL21 (DE3)中诱导表达,得到相对分子质量约20000的p15(Gag)蛋白经western blot鉴定正确.纯化蛋白免疫家兔,制备的多克隆抗体具有较强免疫特异性.结论 得到纯化的HIV-1 p15蛋白,制备的多克隆抗体能够检测自然状态下病毒蛋白p15(Gag),为进一步研究HIV-1奠定了实验基础.
    목적 위료연구HIV-1 p15(Gag)적생물학활성,제비HIV-1 p15(Gag)단백급기특이성항체.방법 용PCR적방법확증편마p15(Gag)기인서렬,장기극륭도원핵표체재체pET28a(+)중표체HIV-1 p15단백,분별용His항체화HIV양성혈청주western blot감정목적 단백.이순화목적 단백위항원면역일본대이백토,제비다극륭항체.통과매련면역흡부실험(ELISA),면역세포화학법검측항체적도급기특이성.결과 원핵표체재체pET28 a(+)-p15(Gag)성공구건,가재대장간균BL21 (DE3)중유도표체,득도상대분자질량약20000적p15(Gag)단백경western blot감정정학.순화단백면역가토,제비적다극륭항체구유교강면역특이성.결론 득도순화적HIV-1 p15단백,제비적다극륭항체능구검측자연상태하병독단백p15(Gag),위진일보연구HIV-1전정료실험기출.
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