临床检验杂志
臨床檢驗雜誌
림상검험잡지
2008年
1期
55-58
,共4页
景蓉蓉%王惠民%鞠少卿%祝文彩%张志泉
景蓉蓉%王惠民%鞠少卿%祝文綵%張誌泉
경용용%왕혜민%국소경%축문채%장지천
晚期糖基化终末产物受体%实时荧光定量PCR%食管癌
晚期糖基化終末產物受體%實時熒光定量PCR%食管癌
만기당기화종말산물수체%실시형광정량PCR%식관암
目的 建立实时荧光定量PCR(RTFQ-PCR)检测人晚期糖基化终末产物受体(RAGE)mRNA的方法并研究其在食管癌组织中的表达.方法 根据Genebank提供的序列在RAGE基因外显子5和6之间设计引物,应用SYBR Green Ⅰ荧光染料,建立检测RAGE mRNA的RTFQ-PCR方法,并对其线性、特异性、灵敏度及重复性进行评价;根据标准曲线计算出食管癌及配对远端正常组织中RAGE mRNA含量,并以RAGE mRNA和18S rRNA含量的比值作为评价RAGE mRNA表达水平指标.结果 线性范围为5.0×103～5.0×109copies/ml,相关系数为-0.98,批内变异系数(CV)为0.63%～8.71%,批间CV为1.52%～12.38%.食管癌及配对远端正常组织RAGE mRNA与18S rRNA浓度的对数比值(-x±s)分别为0.638±0.068和0.334±0.329(P＜0.005),提示食管癌组织RAGE表达上调.结论 RTFQ-PCR检测RAGE mRNA的方法具有灵敏、特异、重复性好等优点,RAGE mRNA表达水平与食管癌存在一定相关性.
目的 建立實時熒光定量PCR(RTFQ-PCR)檢測人晚期糖基化終末產物受體(RAGE)mRNA的方法併研究其在食管癌組織中的錶達.方法 根據Genebank提供的序列在RAGE基因外顯子5和6之間設計引物,應用SYBR Green Ⅰ熒光染料,建立檢測RAGE mRNA的RTFQ-PCR方法,併對其線性、特異性、靈敏度及重複性進行評價;根據標準麯線計算齣食管癌及配對遠耑正常組織中RAGE mRNA含量,併以RAGE mRNA和18S rRNA含量的比值作為評價RAGE mRNA錶達水平指標.結果 線性範圍為5.0×103～5.0×109copies/ml,相關繫數為-0.98,批內變異繫數(CV)為0.63%～8.71%,批間CV為1.52%～12.38%.食管癌及配對遠耑正常組織RAGE mRNA與18S rRNA濃度的對數比值(-x±s)分彆為0.638±0.068和0.334±0.329(P＜0.005),提示食管癌組織RAGE錶達上調.結論 RTFQ-PCR檢測RAGE mRNA的方法具有靈敏、特異、重複性好等優點,RAGE mRNA錶達水平與食管癌存在一定相關性.
목적 건립실시형광정량PCR(RTFQ-PCR)검측인만기당기화종말산물수체(RAGE)mRNA적방법병연구기재식관암조직중적표체.방법 근거Genebank제공적서렬재RAGE기인외현자5화6지간설계인물,응용SYBR Green Ⅰ형광염료,건립검측RAGE mRNA적RTFQ-PCR방법,병대기선성、특이성、령민도급중복성진행평개;근거표준곡선계산출식관암급배대원단정상조직중RAGE mRNA함량,병이RAGE mRNA화18S rRNA함량적비치작위평개RAGE mRNA표체수평지표.결과 선성범위위5.0×103～5.0×109copies/ml,상관계수위-0.98,비내변이계수(CV)위0.63%～8.71%,비간CV위1.52%～12.38%.식관암급배대원단정상조직RAGE mRNA여18S rRNA농도적대수비치(-x±s)분별위0.638±0.068화0.334±0.329(P＜0.005),제시식관암조직RAGE표체상조.결론 RTFQ-PCR검측RAGE mRNA적방법구유령민、특이、중복성호등우점,RAGE mRNA표체수평여식관암존재일정상관성.
