微生物学通报
微生物學通報
미생물학통보
MICROBIOLOGY
2007年
6期
1192-1197
,共6页
叶应旺%吴清平%郭伟鹏%张菊梅%董晓晖
葉應旺%吳清平%郭偉鵬%張菊梅%董曉暉
협응왕%오청평%곽위붕%장국매%동효휘
阪崎肠杆菌%α-1%4-葡萄糖苷酶基因%ompA基因%奶粉
阪崎腸桿菌%α-1%4-葡萄糖苷酶基因%ompA基因%奶粉
판기장간균%α-1%4-포도당감매기인%ompA기인%내분
阪崎肠杆菌是一种目前认为以奶粉为传播媒介的食源性条件致病菌,通过α-1,4-葡萄糖苷酶基因和ompA基因分别设计引物ESF-ESR和ESSF-ESSR,进行单重和双重PCR方法研究,结果显示所有阪崎肠杆菌菌株PCR扩增均为阳性,阴性对照均未扩增出目的片段;纯菌单重PCR灵敏度分别为102 cfu/mL和101cfu/mL,双重PCR灵敏度为103 cfu/mL;在有或无其他细菌存在时,人工污染阪崎肠杆菌模拟样品单重PCR检测灵敏度分别为103 cfu/mL和102 cfu/mL,双重PCR检测灵敏度为104 cfu/mL;实际样品检测显示PCR方法与传统方法具有很好的一致性.结果表明:该PCR方法具有很好的种特异性和灵敏度,能够克服奶粉中杂菌对快速检测阪崎肠杆菌造成的干扰,减少以保守序列来设计引物导致假阳性结果的出现,可以较好地应用于奶粉中阪崎肠杆菌的检测与鉴定.
阪崎腸桿菌是一種目前認為以奶粉為傳播媒介的食源性條件緻病菌,通過α-1,4-葡萄糖苷酶基因和ompA基因分彆設計引物ESF-ESR和ESSF-ESSR,進行單重和雙重PCR方法研究,結果顯示所有阪崎腸桿菌菌株PCR擴增均為暘性,陰性對照均未擴增齣目的片段;純菌單重PCR靈敏度分彆為102 cfu/mL和101cfu/mL,雙重PCR靈敏度為103 cfu/mL;在有或無其他細菌存在時,人工汙染阪崎腸桿菌模擬樣品單重PCR檢測靈敏度分彆為103 cfu/mL和102 cfu/mL,雙重PCR檢測靈敏度為104 cfu/mL;實際樣品檢測顯示PCR方法與傳統方法具有很好的一緻性.結果錶明:該PCR方法具有很好的種特異性和靈敏度,能夠剋服奶粉中雜菌對快速檢測阪崎腸桿菌造成的榦擾,減少以保守序列來設計引物導緻假暘性結果的齣現,可以較好地應用于奶粉中阪崎腸桿菌的檢測與鑒定.
판기장간균시일충목전인위이내분위전파매개적식원성조건치병균,통과α-1,4-포도당감매기인화ompA기인분별설계인물ESF-ESR화ESSF-ESSR,진행단중화쌍중PCR방법연구,결과현시소유판기장간균균주PCR확증균위양성,음성대조균미확증출목적편단;순균단중PCR령민도분별위102 cfu/mL화101cfu/mL,쌍중PCR령민도위103 cfu/mL;재유혹무기타세균존재시,인공오염판기장간균모의양품단중PCR검측령민도분별위103 cfu/mL화102 cfu/mL,쌍중PCR검측령민도위104 cfu/mL;실제양품검측현시PCR방법여전통방법구유흔호적일치성.결과표명:해PCR방법구유흔호적충특이성화령민도,능구극복내분중잡균대쾌속검측판기장간균조성적간우,감소이보수서렬래설계인물도치가양성결과적출현,가이교호지응용우내분중판기장간균적검측여감정.
