解放军医学杂志
解放軍醫學雜誌
해방군의학잡지
MEDICAL JOURNAL OF CHINESE PEOPLE'S LIBERATION ARMY
2007年
10期
1054-1056
,共3页
杨晓%陈梅玲%温博海%牛东升%孙长俭%李青凤
楊曉%陳梅玲%溫博海%牛東升%孫長儉%李青鳳
양효%진매령%온박해%우동승%손장검%리청봉
莫氏立克次体%实时定量PCR%外膜蛋白B基因%地方性斑疹伤寒
莫氏立剋次體%實時定量PCR%外膜蛋白B基因%地方性斑疹傷寒
막씨립극차체%실시정량PCR%외막단백B기인%지방성반진상한
目的 采用TaqMan-MGB探针建立检测莫氏立克次体的实时荧光定量PCR.方法 依据莫氏立克次体外膜蛋白B基因(ompB)设计引物和探针,以克隆的ompB作模板建立实时荧光定量PCR方法.结果 建立的定量标准曲线的循环阈值(Ct)与模板拷贝数呈良好的线性关系(r=0.995);该方法能检出＜10拷贝的莫氏立克次体DNA,敏感性为普通PCR的1 000倍.用该方法检测莫氏立克次体DNA,结果为阳性,但是检测其他相关细菌DNA的结果均为阴性.用该方法检测莫氏立克次体感染豚鼠血标本,50%样本检测为阳性,而普通PCR检测结果均为阴性.结论 该实时荧光定量PCR具有很高的特异性和敏感性,适合于快速检测样本中微量莫氏立克次体DNA,可用于临床实验室快速确诊地方性斑疹伤寒.
目的 採用TaqMan-MGB探針建立檢測莫氏立剋次體的實時熒光定量PCR.方法 依據莫氏立剋次體外膜蛋白B基因(ompB)設計引物和探針,以剋隆的ompB作模闆建立實時熒光定量PCR方法.結果 建立的定量標準麯線的循環閾值(Ct)與模闆拷貝數呈良好的線性關繫(r=0.995);該方法能檢齣＜10拷貝的莫氏立剋次體DNA,敏感性為普通PCR的1 000倍.用該方法檢測莫氏立剋次體DNA,結果為暘性,但是檢測其他相關細菌DNA的結果均為陰性.用該方法檢測莫氏立剋次體感染豚鼠血標本,50%樣本檢測為暘性,而普通PCR檢測結果均為陰性.結論 該實時熒光定量PCR具有很高的特異性和敏感性,適閤于快速檢測樣本中微量莫氏立剋次體DNA,可用于臨床實驗室快速確診地方性斑疹傷寒.
목적 채용TaqMan-MGB탐침건립검측막씨립극차체적실시형광정량PCR.방법 의거막씨립극차체외막단백B기인(ompB)설계인물화탐침,이극륭적ompB작모판건립실시형광정량PCR방법.결과 건립적정량표준곡선적순배역치(Ct)여모판고패수정량호적선성관계(r=0.995);해방법능검출＜10고패적막씨립극차체DNA,민감성위보통PCR적1 000배.용해방법검측막씨립극차체DNA,결과위양성,단시검측기타상관세균DNA적결과균위음성.용해방법검측막씨립극차체감염돈서혈표본,50%양본검측위양성,이보통PCR검측결과균위음성.결론 해실시형광정량PCR구유흔고적특이성화민감성,괄합우쾌속검측양본중미량막씨립극차체DNA,가용우림상실험실쾌속학진지방성반진상한.
