免疫学杂志
免疫學雜誌
면역학잡지
IMMUNOLOGICAL JOURNAL
2007年
4期
370-372
,共3页
冷静%曾霞%郑禹%王启辉%卞钊
冷靜%曾霞%鄭禹%王啟輝%卞釗
랭정%증하%정우%왕계휘%변쇠
csgA%MBP-CsgAIII融合蛋白%多克隆抗体
csgA%MBP-CsgAIII融閤蛋白%多剋隆抗體
csgA%MBP-CsgAIII융합단백%다극륭항체
目的 为进一步研究curli菌毛主要蛋白csgA的功能,利用MBP-CsgA融合蛋白免疫兔子制备抗体.方法 用PCR方法扩增大肠杆菌MHCA4100株的csgA基因,在大肠杆菌中表达MBP-CsgA融合蛋白,免疫家兔以制备抗血清,用Western blotting和免疫电镜鉴定抗MBP-CsgA融合蛋白抗体的特异性.结果 PCR扩增出约476 bp的esgA基因,在大肠杆菌XL1-Blue 中成功地表达了Mr约为58 000的MBP-CsgAm融合蛋白,Western blotting和免疫电镜检测证明,针对MBP-CsgA融合蛋白的抗血清,不仅可特异性地识别MBP-CsgA,也可识别源于大肠杆菌的esgA蛋白,抗血清的最高滴度达1:50 000.结论 亚克隆csgA 基因,成功表达MBP-CsgA融合蛋白,制备并获得其特异性抗curli菌毛抗体.
目的 為進一步研究curli菌毛主要蛋白csgA的功能,利用MBP-CsgA融閤蛋白免疫兔子製備抗體.方法 用PCR方法擴增大腸桿菌MHCA4100株的csgA基因,在大腸桿菌中錶達MBP-CsgA融閤蛋白,免疫傢兔以製備抗血清,用Western blotting和免疫電鏡鑒定抗MBP-CsgA融閤蛋白抗體的特異性.結果 PCR擴增齣約476 bp的esgA基因,在大腸桿菌XL1-Blue 中成功地錶達瞭Mr約為58 000的MBP-CsgAm融閤蛋白,Western blotting和免疫電鏡檢測證明,針對MBP-CsgA融閤蛋白的抗血清,不僅可特異性地識彆MBP-CsgA,也可識彆源于大腸桿菌的esgA蛋白,抗血清的最高滴度達1:50 000.結論 亞剋隆csgA 基因,成功錶達MBP-CsgA融閤蛋白,製備併穫得其特異性抗curli菌毛抗體.
목적 위진일보연구curli균모주요단백csgA적공능,이용MBP-CsgA융합단백면역토자제비항체.방법 용PCR방법확증대장간균MHCA4100주적csgA기인,재대장간균중표체MBP-CsgA융합단백,면역가토이제비항혈청,용Western blotting화면역전경감정항MBP-CsgA융합단백항체적특이성.결과 PCR확증출약476 bp적esgA기인,재대장간균XL1-Blue 중성공지표체료Mr약위58 000적MBP-CsgAm융합단백,Western blotting화면역전경검측증명,침대MBP-CsgA융합단백적항혈청,불부가특이성지식별MBP-CsgA,야가식별원우대장간균적esgA단백,항혈청적최고적도체1:50 000.결론 아극륭csgA 기인,성공표체MBP-CsgA융합단백,제비병획득기특이성항curli균모항체.