植物检疫
植物檢疫
식물검역
PLANT QUARANTINE
2006年
2期
73-75
,共3页
陈招荣%马云霞%范在丰%李怀方
陳招榮%馬雲霞%範在豐%李懷方
진초영%마운하%범재봉%리부방
李属坏死环斑病毒%外壳蛋白%原核表达%抗血清%ELISA
李屬壞死環斑病毒%外殼蛋白%原覈錶達%抗血清%ELISA
리속배사배반병독%외각단백%원핵표체%항혈청%ELISA
本实验用RT-PCR的方法获得李属坏死环斑病毒的cp基因,并将其连接到表达载体pET-22b(+)上,得到重组质粒pET-PNRSVCP,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,用IPTG进行诱导表达.SDS-PAGE和Western blot分析结果表明,cp基因在大肠杆菌中获得了高效表达,获得的融合蛋白分子量约为29.0 kDa.将该融合蛋白免疫兔子,获得PNRSV特异性抗血清.酶联法(ELISA)测定的效价为1/1024.为用血清学方法检测该病毒提供了基础条件.
本實驗用RT-PCR的方法穫得李屬壞死環斑病毒的cp基因,併將其連接到錶達載體pET-22b(+)上,得到重組質粒pET-PNRSVCP,轉化大腸桿菌BL21(DE3)後,用IPTG進行誘導錶達.SDS-PAGE和Western blot分析結果錶明,cp基因在大腸桿菌中穫得瞭高效錶達,穫得的融閤蛋白分子量約為29.0 kDa.將該融閤蛋白免疫兔子,穫得PNRSV特異性抗血清.酶聯法(ELISA)測定的效價為1/1024.為用血清學方法檢測該病毒提供瞭基礎條件.
본실험용RT-PCR적방법획득리속배사배반병독적cp기인,병장기련접도표체재체pET-22b(+)상,득도중조질립pET-PNRSVCP,전화대장간균BL21(DE3)후,용IPTG진행유도표체.SDS-PAGE화Western blot분석결과표명,cp기인재대장간균중획득료고효표체,획득적융합단백분자량약위29.0 kDa.장해융합단백면역토자,획득PNRSV특이성항혈청.매련법(ELISA)측정적효개위1/1024.위용혈청학방법검측해병독제공료기출조건.
