西安交通大学学报（医学版）
西安交通大學學報（醫學版）
서안교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF XI'AN JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2006年
2期
157-159,172
,共4页
许静%李昂%苟建重%许援朝%饶国洲%刘蒸%谢红帼
許靜%李昂%茍建重%許援朝%饒國洲%劉蒸%謝紅幗
허정%리앙%구건중%허원조%요국주%류증%사홍귁
牙龈卟啉菌%蛋白酶%表达载体
牙齦卟啉菌%蛋白酶%錶達載體
아간계람균%단백매%표체재체
目的构建牙龈卟啉菌蛋白酶rgpA催化结构域(rgpAcd)基因的表达载体.方法利用PCR技术和基因重组技术,克隆牙龈卟啉菌蛋白酶rgpAcd,插入中介载体pMD18-T中并测序鉴定.将目的基因片断插入原核表达载体pET-15b,构建表达质粒pET-15b/rgpAcd,通过限制性酶切鉴定.结果PCR产物电泳结果显示,在大约1.5kb处有一特异的条带,与预期的大小一致,核酸序列测定与分析的结果表明,克隆的1 476 bp基因序列与GenBank数据库中的序列呈现100%同源性,未发生任何突变;构建的表达质粒经酶切后所得片断与预期大小一致,表明牙龈卟啉菌蛋白酶rgpAcd基因的表达载体构建成功.结论成功克隆了牙龈卟啉菌rgpAcd基因并构建了表达载体,为进一步研制重组活载体疫苗奠定了基础.
目的構建牙齦卟啉菌蛋白酶rgpA催化結構域(rgpAcd)基因的錶達載體.方法利用PCR技術和基因重組技術,剋隆牙齦卟啉菌蛋白酶rgpAcd,插入中介載體pMD18-T中併測序鑒定.將目的基因片斷插入原覈錶達載體pET-15b,構建錶達質粒pET-15b/rgpAcd,通過限製性酶切鑒定.結果PCR產物電泳結果顯示,在大約1.5kb處有一特異的條帶,與預期的大小一緻,覈痠序列測定與分析的結果錶明,剋隆的1 476 bp基因序列與GenBank數據庫中的序列呈現100%同源性,未髮生任何突變;構建的錶達質粒經酶切後所得片斷與預期大小一緻,錶明牙齦卟啉菌蛋白酶rgpAcd基因的錶達載體構建成功.結論成功剋隆瞭牙齦卟啉菌rgpAcd基因併構建瞭錶達載體,為進一步研製重組活載體疫苗奠定瞭基礎.
목적구건아간계람균단백매rgpA최화결구역(rgpAcd)기인적표체재체.방법이용PCR기술화기인중조기술,극륭아간계람균단백매rgpAcd,삽입중개재체pMD18-T중병측서감정.장목적기인편단삽입원핵표체재체pET-15b,구건표체질립pET-15b/rgpAcd,통과한제성매절감정.결과PCR산물전영결과현시,재대약1.5kb처유일특이적조대,여예기적대소일치,핵산서렬측정여분석적결과표명,극륭적1 476 bp기인서렬여GenBank수거고중적서렬정현100%동원성,미발생임하돌변;구건적표체질립경매절후소득편단여예기대소일치,표명아간계람균단백매rgpAcd기인적표체재체구건성공.결론성공극륭료아간계람균rgpAcd기인병구건료표체재체,위진일보연제중조활재체역묘전정료기출.
