生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2006年
2期
207-209
,共3页
刘卫群%郭红祥%饶学明%于振行%周海梦
劉衛群%郭紅祥%饒學明%于振行%週海夢
류위군%곽홍상%요학명%우진행%주해몽
烟草%多酚氧化酶%分离%纯化
煙草%多酚氧化酶%分離%純化
연초%다분양화매%분리%순화
目的:选择不同的分离、纯化步骤并比对分析,筛选出纯化烟草中多酚氧化酶(PPO)的优化组合方案.方法:采用分段盐析、DEAE-Sepharose Fastflow和Sephadex G-150柱层析纯化PPO,通过测定和比较酶活性筛选最佳条件.结果:确定了最佳盐析浓度(40%)和柱层析条件,SDS-PAGE、FPLC以及动力学常数的检测结果表明,纯化出的蛋白质相对分子质量为42 000,Km为1.2 mmol/L,得到了纯化91倍的烟草多酚氧化酶Ⅱ.结论:优化方案减少了有机溶剂分级沉淀、阳离子交换层析等步骤,使纯化过程大大缩短.
目的:選擇不同的分離、純化步驟併比對分析,篩選齣純化煙草中多酚氧化酶(PPO)的優化組閤方案.方法:採用分段鹽析、DEAE-Sepharose Fastflow和Sephadex G-150柱層析純化PPO,通過測定和比較酶活性篩選最佳條件.結果:確定瞭最佳鹽析濃度(40%)和柱層析條件,SDS-PAGE、FPLC以及動力學常數的檢測結果錶明,純化齣的蛋白質相對分子質量為42 000,Km為1.2 mmol/L,得到瞭純化91倍的煙草多酚氧化酶Ⅱ.結論:優化方案減少瞭有機溶劑分級沉澱、暘離子交換層析等步驟,使純化過程大大縮短.
목적:선택불동적분리、순화보취병비대분석,사선출순화연초중다분양화매(PPO)적우화조합방안.방법:채용분단염석、DEAE-Sepharose Fastflow화Sephadex G-150주층석순화PPO,통과측정화비교매활성사선최가조건.결과:학정료최가염석농도(40%)화주층석조건,SDS-PAGE、FPLC이급동역학상수적검측결과표명,순화출적단백질상대분자질량위42 000,Km위1.2 mmol/L,득도료순화91배적연초다분양화매Ⅱ.결론:우화방안감소료유궤용제분급침정、양리자교환층석등보취,사순화과정대대축단.