CAJ | 학술논문

目的通过观察孕激素对培养血管平滑肌细胞(VSMCs)AT1R mRNA表达的影响,并寻求探索其潜在的分子机制,为临床干预提供实验依据.方法分别用孕激素及其特异性受体拮抗剂对培养的血管平滑肌细胞行不同时间、不同浓度的处理,然后用胰蛋白酶-EDTA消化,离心收集,提取总RNA,用RT-PCR对AT1R mRNA进行半定量分析,利用Western-blot对其相应的蛋白进行测定.结果孕酮对VSMCs AT1R的影响呈现明显的时间依赖性,12 h达到最大值为156%±18%,表现为上调;并呈现浓度依赖性,当孕酮浓度是10-10M时对AT1R mRNA的上调影响达到最大为59.9%±4.2%;孕酮对AT1R mRNA蛋白的上调以12 h为最大,达到最大值为8.44%±1.08%;孕酮受体拮抗剂0.1 nM的米非司酮对VSMCs AT1R mRNA无影响,但米非司酮抵消了孕酮对VSMCs AT1R mRNA的上调作用,而孕酮引起的AT1R mRNA的上调只能被三磷酸肌醇(IP3)的抑制剂Wortmannin所抑制.结论孕酮对VSMCs AT1R mRNA表现为上调,其特征呈现时间和浓度依赖性,其最大上调作用发生于12 h,最大作用的浓度为0.1 nM,孕激素的作用机制可能是与其受体结合后激活了IP3激酶的第二信号系统.
목적통과관찰잉격소대배양혈관평활기세포(VSMCs)AT1R mRNA표체적영향,병심구탐색기잠재적분자궤제,위림상간예제공실험의거.방법분별용잉격소급기특이성수체길항제대배양적혈관평활기세포행불동시간、불동농도적처리,연후용이단백매-EDTA소화,리심수집,제취총RNA,용RT-PCR대AT1R mRNA진행반정량분석,이용Western-blot대기상응적단백진행측정.결과잉동대VSMCs AT1R적영향정현명현적시간의뢰성,12 h체도최대치위156%±18%,표현위상조;병정현농도의뢰성,당잉동농도시10-10M시대AT1R mRNA적상조영향체도최대위59.9%±4.2%;잉동대AT1R mRNA단백적상조이12 h위최대,체도최대치위8.44%±1.08%;잉동수체길항제0.1 nM적미비사동대VSMCs AT1R mRNA무영향,단미비사동저소료잉동대VSMCs AT1R mRNA적상조작용,이잉동인기적AT1R mRNA적상조지능피삼린산기순(IP3)적억제제Wortmannin소억제.결론잉동대VSMCs AT1R mRNA표현위상조,기특정정현시간화농도의뢰성,기최대상조작용발생우12 h,최대작용적농도위0.1 nM,잉격소적작용궤제가능시여기수체결합후격활료IP3격매적제이신호계통.