中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2000年
7期
577-580
,共4页
RNA,反义%遍在蛋白%基因表达调控
RNA,反義%遍在蛋白%基因錶達調控
RNA,반의%편재단백%기인표체조공
目的:建立CROC-1基因表达被阻断的FL-CROC-1-细胞系,研究CROC-1基因在细胞生长中的作用.方法: 运用反义技术将新近发现的人泛素缀合酶样蛋白基因CROC-1的适当长度cDNA片断克隆到本室改建的真核细胞表达载体pMAMneo-amp-中,经限制性内切酶图谱分析筛选出反向插入的表达CROC-1反义RNA的重组质粒.将此反义表达重组质粒(pMAM-antiCROC-1)用改良的磷酸钙法转染人羊膜FL细胞并用含G418的培养基筛选,测定G418抗性的FL-CROC-1- 细胞系的生长速度.结果:建立的FL-CROC-1- 细胞系在地塞米松诱导下CROC-1基因表达被反义抑制后,其生长速度较对照FL细胞及转染了载体pMAMneo-amp- 的FL细胞(FL-MAMneo)的明显要慢(P＜0.05).结论:本研究成功地建立了CROC-1基因表达被阻断的FL-CROC-1- 细胞系,并提示CROC-1基因编码的泛素缀合酶样蛋白在细胞生长中起正调控作用.
目的:建立CROC-1基因錶達被阻斷的FL-CROC-1-細胞繫,研究CROC-1基因在細胞生長中的作用.方法: 運用反義技術將新近髮現的人汎素綴閤酶樣蛋白基因CROC-1的適噹長度cDNA片斷剋隆到本室改建的真覈細胞錶達載體pMAMneo-amp-中,經限製性內切酶圖譜分析篩選齣反嚮插入的錶達CROC-1反義RNA的重組質粒.將此反義錶達重組質粒(pMAM-antiCROC-1)用改良的燐痠鈣法轉染人羊膜FL細胞併用含G418的培養基篩選,測定G418抗性的FL-CROC-1- 細胞繫的生長速度.結果:建立的FL-CROC-1- 細胞繫在地塞米鬆誘導下CROC-1基因錶達被反義抑製後,其生長速度較對照FL細胞及轉染瞭載體pMAMneo-amp- 的FL細胞(FL-MAMneo)的明顯要慢(P＜0.05).結論:本研究成功地建立瞭CROC-1基因錶達被阻斷的FL-CROC-1- 細胞繫,併提示CROC-1基因編碼的汎素綴閤酶樣蛋白在細胞生長中起正調控作用.
목적:건립CROC-1기인표체피조단적FL-CROC-1-세포계,연구CROC-1기인재세포생장중적작용.방법: 운용반의기술장신근발현적인범소철합매양단백기인CROC-1적괄당장도cDNA편단극륭도본실개건적진핵세포표체재체pMAMneo-amp-중,경한제성내절매도보분석사선출반향삽입적표체CROC-1반의RNA적중조질립.장차반의표체중조질립(pMAM-antiCROC-1)용개량적린산개법전염인양막FL세포병용함G418적배양기사선,측정G418항성적FL-CROC-1- 세포계적생장속도.결과:건립적FL-CROC-1- 세포계재지새미송유도하CROC-1기인표체피반의억제후,기생장속도교대조FL세포급전염료재체pMAMneo-amp- 적FL세포(FL-MAMneo)적명현요만(P＜0.05).결론:본연구성공지건립료CROC-1기인표체피조단적FL-CROC-1- 세포계,병제시CROC-1기인편마적범소철합매양단백재세포생장중기정조공작용.
