微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2000年
6期
598-604
,共7页
陈蔚%田宇清%杨海花%谭华荣
陳蔚%田宇清%楊海花%譚華榮
진위%전우청%양해화%담화영
圈卷产色链霉菌%尼可霉素生物合成基因%基因破坏
圈捲產色鏈黴菌%尼可黴素生物閤成基因%基因破壞
권권산색련매균%니가매소생물합성기인%기인파배
通过反向遗传学方法克隆到圈卷产色链霉菌尼可霉素生物合成基因簇中约7.0kb的DNA片段.该片段除含有尼可霉素生物合成基因sanF外,对sanF上游约2.2kb的BglⅡDNA片段进行序列测定及分析表明,还含有两个完整的开放阅读框(ORF).ORF1由1233个核苷酸组成,ORF2由195个核苷酸组成,它们分别编码由410个氨基酸残基和64个氨基酸残基组成的蛋白质,依次命名为sanH和sanI.蛋白序列数据库比较结果表明,SanH和SanI与浅灰链霉菌(Streptomycesgriseolus)中共转录的细胞色素P450(cytochromeP450)和铁氧还蛋白(ferredoxin)有较高的同源性,一致性分别为46%和56%,相似性分别为62%和70%.基因功能研究表明,sanH基因的破坏虽不影响圈卷产色链霉菌产生的尼可霉素的生物活性,但该基因可能参与了尼可霉素羟基化反应的生物合成.
通過反嚮遺傳學方法剋隆到圈捲產色鏈黴菌尼可黴素生物閤成基因簇中約7.0kb的DNA片段.該片段除含有尼可黴素生物閤成基因sanF外,對sanF上遊約2.2kb的BglⅡDNA片段進行序列測定及分析錶明,還含有兩箇完整的開放閱讀框(ORF).ORF1由1233箇覈苷痠組成,ORF2由195箇覈苷痠組成,它們分彆編碼由410箇氨基痠殘基和64箇氨基痠殘基組成的蛋白質,依次命名為sanH和sanI.蛋白序列數據庫比較結果錶明,SanH和SanI與淺灰鏈黴菌(Streptomycesgriseolus)中共轉錄的細胞色素P450(cytochromeP450)和鐵氧還蛋白(ferredoxin)有較高的同源性,一緻性分彆為46%和56%,相似性分彆為62%和70%.基因功能研究錶明,sanH基因的破壞雖不影響圈捲產色鏈黴菌產生的尼可黴素的生物活性,但該基因可能參與瞭尼可黴素羥基化反應的生物閤成.
통과반향유전학방법극륭도권권산색련매균니가매소생물합성기인족중약7.0kb적DNA편단.해편단제함유니가매소생물합성기인sanF외,대sanF상유약2.2kb적BglⅡDNA편단진행서렬측정급분석표명,환함유량개완정적개방열독광(ORF).ORF1유1233개핵감산조성,ORF2유195개핵감산조성,타문분별편마유410개안기산잔기화64개안기산잔기조성적단백질,의차명명위sanH화sanI.단백서렬수거고비교결과표명,SanH화SanI여천회련매균(Streptomycesgriseolus)중공전록적세포색소P450(cytochromeP450)화철양환단백(ferredoxin)유교고적동원성,일치성분별위46%화56%,상사성분별위62%화70%.기인공능연구표명,sanH기인적파배수불영향권권산색련매균산생적니가매소적생물활성,단해기인가능삼여료니가매소간기화반응적생물합성.