科学通报
科學通報
과학통보
CHINESE SCIENCE BULLETIN
2000年
10期
1009-1017
,共9页
蓝斐%余龙%胡培蓉%毛大芩%李晓泉%张民%黄海%赵寿元
藍斐%餘龍%鬍培蓉%毛大芩%李曉泉%張民%黃海%趙壽元
람비%여룡%호배용%모대금%리효천%장민%황해%조수원
人蛋白激酶Bγ%基因%cDNA克隆%组织表达谱%人染色体1q43
人蛋白激酶Bγ%基因%cDNA剋隆%組織錶達譜%人染色體1q43
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蛋白激酶B(PKB)是受第二信使调控的一类蛋白激酶, 在细胞周期调控、葡萄糖吸收和促进细胞分化等生命活动中具有重要作用. 由于其活性在某些人类肿瘤组织中有明显提高, 且参与了Ras信号传导通路, 提示其在某些肿瘤的形成过程中起介导作用. 以小鼠Pkbγ 基因的核苷酸序列为探针, 用同源筛选方法, 从人肝cDNA文库中步移获得一个长1 998 bp的cDNA片段, 包含一段长1 440 bp的ORF, 它编码了479个氨基酸残基. 而后用"电子步移"筛选法, 将该cDNA的 3'端延伸至2 788 bp, 并用PCR扩增法予以证实. 该基因与已知的人PKBα,β的氨基酸序列的同源度分别高达83%和78%. 表达谱分析发现该基因有两个转录本, 其表达丰度基本相同, 大小分别为6.5和8.5 kb. 该基因在人脑组织中表达量最高, 在另15种组织也有不同量的表达. 经过RH制图分析, 发现人PKBγ 基因位于染色体1q43区带的D1S304和D1S2693位标之间, 这对于候选克隆已连锁定位于该区带的前列腺癌, 右心室扩张性心肌病, NK细胞缺陷和甲状旁腺功能减退性身材矮小、智力低下及癫痫发作综合征等疾病基因亦将具有重要的参考价值.
蛋白激酶B(PKB)是受第二信使調控的一類蛋白激酶, 在細胞週期調控、葡萄糖吸收和促進細胞分化等生命活動中具有重要作用. 由于其活性在某些人類腫瘤組織中有明顯提高, 且參與瞭Ras信號傳導通路, 提示其在某些腫瘤的形成過程中起介導作用. 以小鼠Pkbγ 基因的覈苷痠序列為探針, 用同源篩選方法, 從人肝cDNA文庫中步移穫得一箇長1 998 bp的cDNA片段, 包含一段長1 440 bp的ORF, 它編碼瞭479箇氨基痠殘基. 而後用"電子步移"篩選法, 將該cDNA的 3'耑延伸至2 788 bp, 併用PCR擴增法予以證實. 該基因與已知的人PKBα,β的氨基痠序列的同源度分彆高達83%和78%. 錶達譜分析髮現該基因有兩箇轉錄本, 其錶達豐度基本相同, 大小分彆為6.5和8.5 kb. 該基因在人腦組織中錶達量最高, 在另15種組織也有不同量的錶達. 經過RH製圖分析, 髮現人PKBγ 基因位于染色體1q43區帶的D1S304和D1S2693位標之間, 這對于候選剋隆已連鎖定位于該區帶的前列腺癌, 右心室擴張性心肌病, NK細胞缺陷和甲狀徬腺功能減退性身材矮小、智力低下及癲癇髮作綜閤徵等疾病基因亦將具有重要的參攷價值.
단백격매B(PKB)시수제이신사조공적일류단백격매, 재세포주기조공、포도당흡수화촉진세포분화등생명활동중구유중요작용. 유우기활성재모사인류종류조직중유명현제고, 차삼여료Ras신호전도통로, 제시기재모사종류적형성과정중기개도작용. 이소서Pkbγ 기인적핵감산서렬위탐침, 용동원사선방법, 종인간cDNA문고중보이획득일개장1 998 bp적cDNA편단, 포함일단장1 440 bp적ORF, 타편마료479개안기산잔기. 이후용"전자보이"사선법, 장해cDNA적 3'단연신지2 788 bp, 병용PCR확증법여이증실. 해기인여이지적인PKBα,β적안기산서렬적동원도분별고체83%화78%. 표체보분석발현해기인유량개전록본, 기표체봉도기본상동, 대소분별위6.5화8.5 kb. 해기인재인뇌조직중표체량최고, 재령15충조직야유불동량적표체. 경과RH제도분석, 발현인PKBγ 기인위우염색체1q43구대적D1S304화D1S2693위표지간, 저대우후선극륭이련쇄정위우해구대적전렬선암, 우심실확장성심기병, NK세포결함화갑상방선공능감퇴성신재왜소、지력저하급전간발작종합정등질병기인역장구유중요적삼고개치.
