海南医学院学报
海南醫學院學報
해남의학원학보
2003年
2期
72-77
,共6页
李孟森%李平风%贺师鹏%杜国光%李刚
李孟森%李平風%賀師鵬%杜國光%李剛
리맹삼%리평풍%하사붕%두국광%리강
甲胎蛋白类%3T3细胞%AFP受体%细胞增殖%信号传递%基因表达调控
甲胎蛋白類%3T3細胞%AFP受體%細胞增殖%信號傳遞%基因錶達調控
갑태단백류%3T3세포%AFP수체%세포증식%신호전체%기인표체조공
目的:探讨甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)促新生细胞增殖作用的分子机理.方法:从人脐带血中提取的AFP作用于体外培养的MH3T3细胞;用3H-TdR参入法观察AFP对细胞DNA合成的影响以及放射受体分析法分析MH3T3细胞膜表面AFP受体分布;观察在AFP作用下细胞内的第二信使物质环磷酸腺苷(cAMP)浓度及依赖cAMP激活的蛋白激酶A(PKA)活性的改变;Western blot分析AFP对增殖相关的P2lras表达的影响.结果:10～80 mg/L的AFP对MH3T3细胞的DNA合成有明显的促进作用,与对照组比较最大增幅为121.9%;在MH3T3细胞膜表面存在2种不同解离平衡常数(KD)的AFP受体,KD1=2.722 nmol/L(12 810位点/细胞);KD2=89.305 nmol/L(119700位点/细胞);AFP能显著提高NIH3T3细胞内的cAMP浓度及PKA活性:对P21ras的表达也有明显的促进作用.结论:AFP促MH3T3细胞增殖是通过细胞膜表面受体介导,经跨膜cAMP-PKA信号转导途径,影响基因表达来实现的.
目的:探討甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)促新生細胞增殖作用的分子機理.方法:從人臍帶血中提取的AFP作用于體外培養的MH3T3細胞;用3H-TdR參入法觀察AFP對細胞DNA閤成的影響以及放射受體分析法分析MH3T3細胞膜錶麵AFP受體分佈;觀察在AFP作用下細胞內的第二信使物質環燐痠腺苷(cAMP)濃度及依賴cAMP激活的蛋白激酶A(PKA)活性的改變;Western blot分析AFP對增殖相關的P2lras錶達的影響.結果:10～80 mg/L的AFP對MH3T3細胞的DNA閤成有明顯的促進作用,與對照組比較最大增幅為121.9%;在MH3T3細胞膜錶麵存在2種不同解離平衡常數(KD)的AFP受體,KD1=2.722 nmol/L(12 810位點/細胞);KD2=89.305 nmol/L(119700位點/細胞);AFP能顯著提高NIH3T3細胞內的cAMP濃度及PKA活性:對P21ras的錶達也有明顯的促進作用.結論:AFP促MH3T3細胞增殖是通過細胞膜錶麵受體介導,經跨膜cAMP-PKA信號轉導途徑,影響基因錶達來實現的.
목적:탐토갑태단백(alpha-fetoprotein,AFP)촉신생세포증식작용적분자궤리.방법:종인제대혈중제취적AFP작용우체외배양적MH3T3세포;용3H-TdR삼입법관찰AFP대세포DNA합성적영향이급방사수체분석법분석MH3T3세포막표면AFP수체분포;관찰재AFP작용하세포내적제이신사물질배린산선감(cAMP)농도급의뢰cAMP격활적단백격매A(PKA)활성적개변;Western blot분석AFP대증식상관적P2lras표체적영향.결과:10～80 mg/L적AFP대MH3T3세포적DNA합성유명현적촉진작용,여대조조비교최대증폭위121.9%;재MH3T3세포막표면존재2충불동해리평형상수(KD)적AFP수체,KD1=2.722 nmol/L(12 810위점/세포);KD2=89.305 nmol/L(119700위점/세포);AFP능현저제고NIH3T3세포내적cAMP농도급PKA활성:대P21ras적표체야유명현적촉진작용.결론:AFP촉MH3T3세포증식시통과세포막표면수체개도,경과막cAMP-PKA신호전도도경,영향기인표체래실현적.
