CAJ | 학술논문

利用抗黄矮病小麦-中间偃麦草易位系HW642的细胞核DNA构建了一个可转化人工染色体(transformation-competent artificial chromosome,TAC)文库,文库由2.3×106克隆构成,重组率为90.48%,平均插入片段大小为22kb左右,约覆盖普通小麦单倍体基因组2.5倍,在该文库中分离得到单拷贝DNA序列的几率约是95.77%.文库保存在24块96孔板中,每个孔中约含有1000个不同的重组克隆,可以采用Pooled PCR的方法对文库进行筛选.用来源于小麦的简单重复序列(simple sequence repeat,SSR)引物wms37扩增中间偃麦草、抗病易位系及感病材料,得到一条与抗性共分离的特异条带,约450bp.将此特异标记条带转化为SCAR(sequence characterized amplified region)标记,用于筛选HW642基因组TAC文库,得到12个阳性克隆.对阳性克隆进行了PCR-Southern验证,以中间偃麦草基因组总DNA为探针与限制酶HindⅢ消化后的阳性克隆杂交,其中10个阳性克隆分别有1～6条杂交带,结果表明,这10个阳性克隆可作为抗黄矮病相关基因筛选的候选克隆.
이용항황왜병소맥-중간언맥초역위계HW642적세포핵DNA구건료일개가전화인공염색체(transformation-competent artificial chromosome,TAC)문고,문고유2.3×106극륭구성,중조솔위90.48%,평균삽입편단대소위22kb좌우,약복개보통소맥단배체기인조2.5배,재해문고중분리득도단고패DNA서렬적궤솔약시95.77%.문고보존재24괴96공판중,매개공중약함유1000개불동적중조극륭,가이채용Pooled PCR적방법대문고진행사선.용래원우소맥적간단중복서렬(simple sequence repeat,SSR)인물wms37확증중간언맥초、항병역위계급감병재료,득도일조여항성공분리적특이조대,약450bp.장차특이표기조대전화위SCAR(sequence characterized amplified region)표기,용우사선HW642기인조TAC문고,득도12개양성극륭.대양성극륭진행료PCR-Southern험증,이중간언맥초기인조총DNA위탐침여한제매HindⅢ소화후적양성극륭잡교,기중10개양성극륭분별유1～6조잡교대,결과표명,저10개양성극륭가작위항황왜병상관기인사선적후선극륭.