第四军医大学学报
第四軍醫大學學報
제사군의대학학보
JOURNAL OF THE FOURTH MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2001年
14期
1283-1286
,共4页
范雄林%徐志凯%李元%薛莹%张芳琳%李别虎%白光春
範雄林%徐誌凱%李元%薛瑩%張芳琳%李彆虎%白光春
범웅림%서지개%리원%설형%장방림%리별호%백광춘
分枝杆菌,结核%疫苗,DNA%基因%免疫性%免疫原性%Ag85B
分枝桿菌,結覈%疫苗,DNA%基因%免疫性%免疫原性%Ag85B
분지간균,결핵%역묘,DNA%기인%면역성%면역원성%Ag85B
目的研究已构建的编码结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, MTB)H37Ra株Ag85B成熟蛋白基因的真核表达质粒pTB30m的表达和免疫原性. 方法以电穿孔法将pTB30m转染CHO细胞,RT-PCR法检测转染细胞中Ag85B特异的mRNA的表达. 将pTB30m质粒肌注免疫BALB/c和C57BL/6小鼠,ELISA法检测基因免疫的体液免疫应答效果. 分离免疫小鼠的脾淋巴细胞,体外用抗原再刺激,生物学方法检测IFNγ产生水平和MTT法检测淋巴细胞增殖. 结果 RT-PCR检测证实pTB30m可在CHO细胞中表达. pTB30m免疫小鼠可引起较高水平的Ag85B特异性的抗体应答. 免疫小鼠的脾淋巴细胞,体外用抗原再刺激,淋巴细胞增殖显著,BALB/c和C57BL/6小鼠IFNγ的量分别达到1360 ng*L-1和1965 ng*L-1 ,而生理盐水和空质粒对照组均低于80 ng*L-1. 结论应进一步研究pTB30m作为TB的基因疫苗用于TB的防治的效果.
目的研究已構建的編碼結覈分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis, MTB)H37Ra株Ag85B成熟蛋白基因的真覈錶達質粒pTB30m的錶達和免疫原性. 方法以電穿孔法將pTB30m轉染CHO細胞,RT-PCR法檢測轉染細胞中Ag85B特異的mRNA的錶達. 將pTB30m質粒肌註免疫BALB/c和C57BL/6小鼠,ELISA法檢測基因免疫的體液免疫應答效果. 分離免疫小鼠的脾淋巴細胞,體外用抗原再刺激,生物學方法檢測IFNγ產生水平和MTT法檢測淋巴細胞增殖. 結果 RT-PCR檢測證實pTB30m可在CHO細胞中錶達. pTB30m免疫小鼠可引起較高水平的Ag85B特異性的抗體應答. 免疫小鼠的脾淋巴細胞,體外用抗原再刺激,淋巴細胞增殖顯著,BALB/c和C57BL/6小鼠IFNγ的量分彆達到1360 ng*L-1和1965 ng*L-1 ,而生理鹽水和空質粒對照組均低于80 ng*L-1. 結論應進一步研究pTB30m作為TB的基因疫苗用于TB的防治的效果.
목적연구이구건적편마결핵분지간균(Mycobacterium tuberculosis, MTB)H37Ra주Ag85B성숙단백기인적진핵표체질립pTB30m적표체화면역원성. 방법이전천공법장pTB30m전염CHO세포,RT-PCR법검측전염세포중Ag85B특이적mRNA적표체. 장pTB30m질립기주면역BALB/c화C57BL/6소서,ELISA법검측기인면역적체액면역응답효과. 분리면역소서적비림파세포,체외용항원재자격,생물학방법검측IFNγ산생수평화MTT법검측림파세포증식. 결과 RT-PCR검측증실pTB30m가재CHO세포중표체. pTB30m면역소서가인기교고수평적Ag85B특이성적항체응답. 면역소서적비림파세포,체외용항원재자격,림파세포증식현저,BALB/c화C57BL/6소서IFNγ적량분별체도1360 ng*L-1화1965 ng*L-1 ,이생리염수화공질립대조조균저우80 ng*L-1. 결론응진일보연구pTB30m작위TB적기인역묘용우TB적방치적효과.
