华中科技大学学报(医学版)
華中科技大學學報(醫學版)
화중과기대학학보(의학판)
JOURNAL OF HUAZHONG UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY(HEALTH SCIENCES)
2003年
6期
578-581
,共4页
汉坦病毒%糖蛋白G1%白细胞介素2%融合蛋白
漢坦病毒%糖蛋白G1%白細胞介素2%融閤蛋白
한탄병독%당단백G1%백세포개소2%융합단백
目的构建融合基因pcDNA3.1/His B-IL-2 G1,为进一步研究汉坦病毒新型裸DNA疫苗奠定基础.方法采用PCR从含有人源IL-2的质粒中扩增出IL-2片段,将人源IL-2插入真核表达载体pcDNA3.1/His-B中,构建的质粒命名为pcDNA3.1/His-B-IL-2.同样采用PCR扩增汉坦病毒H8205株G1基因片段,将回收的G1片段经双酶切插入到pcDNA3.1/His-B-IL-2,构建成新的质粒pcDNA3.1/His-B-IL-2-G1.采用脂质体介导包裹,转入NIH3T3细胞中进行瞬时表达;采用原位杂交观察细胞内的基因表达,SDS-PAGE法作重组质粒pcDNA3.1/His-B-IL-2-G1瞬时表达产物的鉴定.结果融合基因可转录并表达一分子量为78 kD左右的蛋白,对照组则未见电泳条带出现.结论成功构建pcDNA3.1/His-B-IL-2-G1融合基因,融合基因能在真核细胞中瞬时表达.
目的構建融閤基因pcDNA3.1/His B-IL-2 G1,為進一步研究漢坦病毒新型裸DNA疫苗奠定基礎.方法採用PCR從含有人源IL-2的質粒中擴增齣IL-2片段,將人源IL-2插入真覈錶達載體pcDNA3.1/His-B中,構建的質粒命名為pcDNA3.1/His-B-IL-2.同樣採用PCR擴增漢坦病毒H8205株G1基因片段,將迴收的G1片段經雙酶切插入到pcDNA3.1/His-B-IL-2,構建成新的質粒pcDNA3.1/His-B-IL-2-G1.採用脂質體介導包裹,轉入NIH3T3細胞中進行瞬時錶達;採用原位雜交觀察細胞內的基因錶達,SDS-PAGE法作重組質粒pcDNA3.1/His-B-IL-2-G1瞬時錶達產物的鑒定.結果融閤基因可轉錄併錶達一分子量為78 kD左右的蛋白,對照組則未見電泳條帶齣現.結論成功構建pcDNA3.1/His-B-IL-2-G1融閤基因,融閤基因能在真覈細胞中瞬時錶達.
목적구건융합기인pcDNA3.1/His B-IL-2 G1,위진일보연구한탄병독신형라DNA역묘전정기출.방법채용PCR종함유인원IL-2적질립중확증출IL-2편단,장인원IL-2삽입진핵표체재체pcDNA3.1/His-B중,구건적질립명명위pcDNA3.1/His-B-IL-2.동양채용PCR확증한탄병독H8205주G1기인편단,장회수적G1편단경쌍매절삽입도pcDNA3.1/His-B-IL-2,구건성신적질립pcDNA3.1/His-B-IL-2-G1.채용지질체개도포과,전입NIH3T3세포중진행순시표체;채용원위잡교관찰세포내적기인표체,SDS-PAGE법작중조질립pcDNA3.1/His-B-IL-2-G1순시표체산물적감정.결과융합기인가전록병표체일분자량위78 kD좌우적단백,대조조칙미견전영조대출현.결론성공구건pcDNA3.1/His-B-IL-2-G1융합기인,융합기인능재진핵세포중순시표체.
