中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2007年
1期
1-5
,共5页
主鸿鹄%刘艳荣%秦亚溱%李金兰%常艳%王亚哲%单福香%江滨%陆道培
主鴻鵠%劉豔榮%秦亞溱%李金蘭%常豔%王亞哲%單福香%江濱%陸道培
주홍곡%류염영%진아진%리금란%상염%왕아철%단복향%강빈%륙도배
白血病%急性早幼粒细胞白血病%实时定量PCR%PML/RARα
白血病%急性早幼粒細胞白血病%實時定量PCR%PML/RARα
백혈병%급성조유립세포백혈병%실시정량PCR%PML/RARα
本研究探讨实时定量PCR(Q-PCR)检测PML/RARα mRNA的方法学,并对46例初诊急性早幼粒细胞白血病(APL)患者骨髓标本进行检测.构建PML/RARα的bcr1型和bcr3型转录本以及内参照abl基因转录本的阳性标准品质粒;利用ABI Prism 7500型Q-PCR仪对46例初诊APL患者和40例非APL患者骨髓标本进行检测,PML/RARα mRNA定量结果以校正比值(NQ)表示,NQ=PML/RARα mRNA拷贝数/ABLmRNA拷贝数;应用四色流式细胞术检测免疫表型.结果显示,Q-PCR结果的日间差和日内差平均变异系数(CV)分别为1.58%和0.88%.可重复敏感度为可以检测5 copies/100 ng RNA.40例非APL患者PML/RARα mRNA均为阴性.46例初诊APL患者PML/RARαmRNA表达量NQ中位值为0.450(0.084-1.082).比较32例bcr1型和14例bcr3型两组患者的特征表明,PML/RARαmRNA NQ中位值分别为0.454(0.084-1.082)和0.386(0.151-0.848)(P＞0.05).形态学诊断M3v的患者比例分别为9.40%和48.96%(P＜0.05);初诊时WBC中位数分别为2.15(0.2-59.6)和9.35(0.91-122.8)(P＜0.05),而在性别、年龄、初诊时血红蛋白和血小板计数、骨髓中APL细胞比例、DIC指标等方面无差异.流式细胞仪术检测时,CD45/SSC射门情况下,APL细胞群分布可以分为两类:高侧向角(L-SSC,粗颗粒)和非高侧向角(NL-SSC,细颗粒)两类.bcr1型患者中85.70%表现为L-SSC,而bcr3型患者中64.29%表现为NL-SSC.结论:建立的Q-PCR方法稳定可靠,敏感度高;bcr1型和bcr3型APL患者的PML/RARαmRNA表达量无差异,bcr3型APL患者中形态学M3v比例和WBC数比bcr1型患者高;PML/RARα不同转录本类型和免疫表型以及细胞形态学之间有一定的相关性.
本研究探討實時定量PCR(Q-PCR)檢測PML/RARα mRNA的方法學,併對46例初診急性早幼粒細胞白血病(APL)患者骨髓標本進行檢測.構建PML/RARα的bcr1型和bcr3型轉錄本以及內參照abl基因轉錄本的暘性標準品質粒;利用ABI Prism 7500型Q-PCR儀對46例初診APL患者和40例非APL患者骨髓標本進行檢測,PML/RARα mRNA定量結果以校正比值(NQ)錶示,NQ=PML/RARα mRNA拷貝數/ABLmRNA拷貝數;應用四色流式細胞術檢測免疫錶型.結果顯示,Q-PCR結果的日間差和日內差平均變異繫數(CV)分彆為1.58%和0.88%.可重複敏感度為可以檢測5 copies/100 ng RNA.40例非APL患者PML/RARα mRNA均為陰性.46例初診APL患者PML/RARαmRNA錶達量NQ中位值為0.450(0.084-1.082).比較32例bcr1型和14例bcr3型兩組患者的特徵錶明,PML/RARαmRNA NQ中位值分彆為0.454(0.084-1.082)和0.386(0.151-0.848)(P＞0.05).形態學診斷M3v的患者比例分彆為9.40%和48.96%(P＜0.05);初診時WBC中位數分彆為2.15(0.2-59.6)和9.35(0.91-122.8)(P＜0.05),而在性彆、年齡、初診時血紅蛋白和血小闆計數、骨髓中APL細胞比例、DIC指標等方麵無差異.流式細胞儀術檢測時,CD45/SSC射門情況下,APL細胞群分佈可以分為兩類:高側嚮角(L-SSC,粗顆粒)和非高側嚮角(NL-SSC,細顆粒)兩類.bcr1型患者中85.70%錶現為L-SSC,而bcr3型患者中64.29%錶現為NL-SSC.結論:建立的Q-PCR方法穩定可靠,敏感度高;bcr1型和bcr3型APL患者的PML/RARαmRNA錶達量無差異,bcr3型APL患者中形態學M3v比例和WBC數比bcr1型患者高;PML/RARα不同轉錄本類型和免疫錶型以及細胞形態學之間有一定的相關性.
본연구탐토실시정량PCR(Q-PCR)검측PML/RARα mRNA적방법학,병대46례초진급성조유립세포백혈병(APL)환자골수표본진행검측.구건PML/RARα적bcr1형화bcr3형전록본이급내삼조abl기인전록본적양성표준품질립;이용ABI Prism 7500형Q-PCR의대46례초진APL환자화40례비APL환자골수표본진행검측,PML/RARα mRNA정량결과이교정비치(NQ)표시,NQ=PML/RARα mRNA고패수/ABLmRNA고패수;응용사색류식세포술검측면역표형.결과현시,Q-PCR결과적일간차화일내차평균변이계수(CV)분별위1.58%화0.88%.가중복민감도위가이검측5 copies/100 ng RNA.40례비APL환자PML/RARα mRNA균위음성.46례초진APL환자PML/RARαmRNA표체량NQ중위치위0.450(0.084-1.082).비교32례bcr1형화14례bcr3형량조환자적특정표명,PML/RARαmRNA NQ중위치분별위0.454(0.084-1.082)화0.386(0.151-0.848)(P＞0.05).형태학진단M3v적환자비례분별위9.40%화48.96%(P＜0.05);초진시WBC중위수분별위2.15(0.2-59.6)화9.35(0.91-122.8)(P＜0.05),이재성별、년령、초진시혈홍단백화혈소판계수、골수중APL세포비례、DIC지표등방면무차이.류식세포의술검측시,CD45/SSC사문정황하,APL세포군분포가이분위량류:고측향각(L-SSC,조과립)화비고측향각(NL-SSC,세과립)량류.bcr1형환자중85.70%표현위L-SSC,이bcr3형환자중64.29%표현위NL-SSC.결론:건립적Q-PCR방법은정가고,민감도고;bcr1형화bcr3형APL환자적PML/RARαmRNA표체량무차이,bcr3형APL환자중형태학M3v비례화WBC수비bcr1형환자고;PML/RARα불동전록본류형화면역표형이급세포형태학지간유일정적상관성.
