海洋科学
海洋科學
해양과학
MARINE SCIENCES
2008年
8期
64-69
,共6页
叶志云%金利华%邹海鹰%骆晶晶%林圣彩
葉誌雲%金利華%鄒海鷹%駱晶晶%林聖綵
협지운%금리화%추해응%락정정%림골채
G蛋白%克隆%凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)
G蛋白%剋隆%凡納濱對蝦(Litopenaeus vannamei)
G단백%극륭%범납빈대하(Litopenaeus vannamei)
为了寻找并克隆凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)G蛋白α亚基,为研究对虾的生理调控提供理论基础,通过简并PCR和RACE反应获得目的基因的全长cDNA序列;用Blast, DNAstar和Genedoc软件对所得序列进行分析,确定所得序列为凡纳滨对虾G蛋白Gαq基因,命名为pvGαq.将该基因的编码序列克隆到表达载体,通过免疫共沉淀实验和胞内Ca2+, IP3浓度的测定鉴定该Gαq亚基的功能,发现该亚基的序列和功能与其他Gαq家族成员具有高度保守性.用Western blotting分析发现pvGαq在对虾身体各部位存在普遍分布,尤其在脑神经、眼柄、腮和颚片中有大量表达,在嗅觉器官触角也有适量分布.说明了pvGαq在对虾生命活动中的重要性,为研究对虾的生理调控奠定了理论基础.
為瞭尋找併剋隆凡納濱對蝦(Litopenaeus vannamei)G蛋白α亞基,為研究對蝦的生理調控提供理論基礎,通過簡併PCR和RACE反應穫得目的基因的全長cDNA序列;用Blast, DNAstar和Genedoc軟件對所得序列進行分析,確定所得序列為凡納濱對蝦G蛋白Gαq基因,命名為pvGαq.將該基因的編碼序列剋隆到錶達載體,通過免疫共沉澱實驗和胞內Ca2+, IP3濃度的測定鑒定該Gαq亞基的功能,髮現該亞基的序列和功能與其他Gαq傢族成員具有高度保守性.用Western blotting分析髮現pvGαq在對蝦身體各部位存在普遍分佈,尤其在腦神經、眼柄、腮和顎片中有大量錶達,在嗅覺器官觸角也有適量分佈.說明瞭pvGαq在對蝦生命活動中的重要性,為研究對蝦的生理調控奠定瞭理論基礎.
위료심조병극륭범납빈대하(Litopenaeus vannamei)G단백α아기,위연구대하적생리조공제공이론기출,통과간병PCR화RACE반응획득목적기인적전장cDNA서렬;용Blast, DNAstar화Genedoc연건대소득서렬진행분석,학정소득서렬위범납빈대하G단백Gαq기인,명명위pvGαq.장해기인적편마서렬극륭도표체재체,통과면역공침정실험화포내Ca2+, IP3농도적측정감정해Gαq아기적공능,발현해아기적서렬화공능여기타Gαq가족성원구유고도보수성.용Western blotting분석발현pvGαq재대하신체각부위존재보편분포,우기재뇌신경、안병、시화악편중유대량표체,재후각기관촉각야유괄량분포.설명료pvGαq재대하생명활동중적중요성,위연구대하적생리조공전정료이론기출.
