家畜生态学报
傢畜生態學報
가축생태학보
ACTA ECOLOGAE ANIMALIS DOMASTICI
2009年
3期
14-16,31
,共4页
岳明星%袁天翔%孔振兴%吕文发
嶽明星%袁天翔%孔振興%呂文髮
악명성%원천상%공진흥%려문발
奶牛%SRY基因%pPIC9K
奶牛%SRY基因%pPIC9K
내우%SRY기인%pPIC9K
SRY基因是哺乳动物性别分化与控制的主导基因,参与有序的、多层次调控性别分化和控制的过程.本研究从牛血中提取总RNA,设计特异性引物,利用RT-PCR技术扩增出SRY基因HMG box基因片段,将该片段与pMD18-T载体连接并转化到大肠杆菌(E.coli Top)10中,提取质粒并用EcoRⅠ、AvrⅡ酶消化,将消化后的目的基因纯化并回收,与经同样的酶消化后并纯化回收的载体pPIC9K连接并转化到E.coliTop10,获得重组表达质粒pPIC9K-SRYHMG box,经PCR、酶切、测序验证了此载体构建成功,为下一步使用毕赤酵母表达SRY蛋白打下基础.
SRY基因是哺乳動物性彆分化與控製的主導基因,參與有序的、多層次調控性彆分化和控製的過程.本研究從牛血中提取總RNA,設計特異性引物,利用RT-PCR技術擴增齣SRY基因HMG box基因片段,將該片段與pMD18-T載體連接併轉化到大腸桿菌(E.coli Top)10中,提取質粒併用EcoRⅠ、AvrⅡ酶消化,將消化後的目的基因純化併迴收,與經同樣的酶消化後併純化迴收的載體pPIC9K連接併轉化到E.coliTop10,穫得重組錶達質粒pPIC9K-SRYHMG box,經PCR、酶切、測序驗證瞭此載體構建成功,為下一步使用畢赤酵母錶達SRY蛋白打下基礎.
SRY기인시포유동물성별분화여공제적주도기인,삼여유서적、다층차조공성별분화화공제적과정.본연구종우혈중제취총RNA,설계특이성인물,이용RT-PCR기술확증출SRY기인HMG box기인편단,장해편단여pMD18-T재체련접병전화도대장간균(E.coli Top)10중,제취질립병용EcoRⅠ、AvrⅡ매소화,장소화후적목적기인순화병회수,여경동양적매소화후병순화회수적재체pPIC9K련접병전화도E.coliTop10,획득중조표체질립pPIC9K-SRYHMG box,경PCR、매절、측서험증료차재체구건성공,위하일보사용필적효모표체SRY단백타하기출.