广东医学
廣東醫學
엄동의학
GUNAGDONG MEDICAL JOURNAL
2012年
6期
726-729
,共4页
李敏%轩小燕%黄玉敏%臧文巧%赵国强
李敏%軒小燕%黃玉敏%臧文巧%趙國彊
리민%헌소연%황옥민%장문교%조국강
DNA聚合酶β%食管癌细胞%耐药细胞%转染
DNA聚閤酶β%食管癌細胞%耐藥細胞%轉染
DNA취합매β%식관암세포%내약세포%전염
目的 比较药物诱导和耐药基因转染两种方法 所建立的人食管癌顺铂耐药细胞系的不同特点.方法 顺铂(cDDP)中等浓度、间歇作用法历时9个月建立食管癌耐药细胞系Ec9706/cDDP;同时采用脂质体转染法将人野生型DNA聚合酶β(polβ)的重组绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-AC3转染入食管癌细胞Ec9706,经G418筛选得到稳定转染细胞系Ec9706-AC3.荧光显微镜观察转染效果,普通倒置显微镜观察细胞形态变化.绘制生长曲线,计算群体倍增时间.RT-PCR方法 检测细胞中polβ mRNA的表达水平,MTT法测细胞对顺铂的敏感性,并观察冻存复苏、撤药培养对耐药性的影响.结果 两种方法 所获耐药细胞与亲本细胞相比形态无明显变化,polβ mRNA表达均增加.Ec9706/cDDP耐药指数为15.70±1.16,冻存复苏对耐药指数影响不大,而撤药培养可使耐药性降低,细胞群体倍增时间延长;Ec9706-AC3细胞耐药指数为1.78±0.67,不受冻存复苏、撤药培养的影响,细胞群体倍增时间不变.结论 用不同方法 成功建立两种人食管癌顺铂耐药细胞,不同方法 获得的耐药细胞生物学特性有所不同.
目的 比較藥物誘導和耐藥基因轉染兩種方法 所建立的人食管癌順鉑耐藥細胞繫的不同特點.方法 順鉑(cDDP)中等濃度、間歇作用法歷時9箇月建立食管癌耐藥細胞繫Ec9706/cDDP;同時採用脂質體轉染法將人野生型DNA聚閤酶β(polβ)的重組綠色熒光蛋白錶達載體pEGFP-AC3轉染入食管癌細胞Ec9706,經G418篩選得到穩定轉染細胞繫Ec9706-AC3.熒光顯微鏡觀察轉染效果,普通倒置顯微鏡觀察細胞形態變化.繪製生長麯線,計算群體倍增時間.RT-PCR方法 檢測細胞中polβ mRNA的錶達水平,MTT法測細胞對順鉑的敏感性,併觀察凍存複囌、撤藥培養對耐藥性的影響.結果 兩種方法 所穫耐藥細胞與親本細胞相比形態無明顯變化,polβ mRNA錶達均增加.Ec9706/cDDP耐藥指數為15.70±1.16,凍存複囌對耐藥指數影響不大,而撤藥培養可使耐藥性降低,細胞群體倍增時間延長;Ec9706-AC3細胞耐藥指數為1.78±0.67,不受凍存複囌、撤藥培養的影響,細胞群體倍增時間不變.結論 用不同方法 成功建立兩種人食管癌順鉑耐藥細胞,不同方法 穫得的耐藥細胞生物學特性有所不同.
목적 비교약물유도화내약기인전염량충방법 소건립적인식관암순박내약세포계적불동특점.방법 순박(cDDP)중등농도、간헐작용법력시9개월건립식관암내약세포계Ec9706/cDDP;동시채용지질체전염법장인야생형DNA취합매β(polβ)적중조록색형광단백표체재체pEGFP-AC3전염입식관암세포Ec9706,경G418사선득도은정전염세포계Ec9706-AC3.형광현미경관찰전염효과,보통도치현미경관찰세포형태변화.회제생장곡선,계산군체배증시간.RT-PCR방법 검측세포중polβ mRNA적표체수평,MTT법측세포대순박적민감성,병관찰동존복소、철약배양대내약성적영향.결과 량충방법 소획내약세포여친본세포상비형태무명현변화,polβ mRNA표체균증가.Ec9706/cDDP내약지수위15.70±1.16,동존복소대내약지수영향불대,이철약배양가사내약성강저,세포군체배증시간연장;Ec9706-AC3세포내약지수위1.78±0.67,불수동존복소、철약배양적영향,세포군체배증시간불변.결론 용불동방법 성공건립량충인식관암순박내약세포,불동방법 획득적내약세포생물학특성유소불동.
