农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2007年
3期
459-463
,共5页
于晓英%卢向阳%陈永华%李达%姚觉%张宏志
于曉英%盧嚮暘%陳永華%李達%姚覺%張宏誌
우효영%로향양%진영화%리체%요각%장굉지
瓜叶菊(Senecio×hybridus)%热胁迫%mRNA差异显示
瓜葉菊(Senecio×hybridus)%熱脅迫%mRNA差異顯示
과협국(Senecio×hybridus)%열협박%mRNA차이현시
应用mRNA差异显示技术(DDRT-PCR),对瓜叶菊(Senecio×hybridus)离体筛选获得的耐热变异体N1-2-1及其母株N1在热胁迫下的基因差异表达进行分析.结果显示,从40对引物中共扩增出1 419条,筛选到100条在热胁迫下耐热变异体N1-2-1和母株N1间差异明显的基因片段,差异率为7.05%,其中41条差异片段来自N1-2-1,其中有6个片段(DF1~DF6)经过Northern杂交验证只在N1-2-1中表达而在母株N1中不表达.进一步克隆测序和数据库比对分析表明,DF3和DF4分别与马铃薯和水稻热胁迫时产生的应答反应有关,其中DF4与热休克蛋白HSP70部分序列高度同源,DF3与HSP结合蛋白部分序列高度同源;DF1与花色素苷转酰基酶有关,另外3个(DF2、DF5和DF6)未发现蛋白质同源序列,推测为新的cDNA片段.
應用mRNA差異顯示技術(DDRT-PCR),對瓜葉菊(Senecio×hybridus)離體篩選穫得的耐熱變異體N1-2-1及其母株N1在熱脅迫下的基因差異錶達進行分析.結果顯示,從40對引物中共擴增齣1 419條,篩選到100條在熱脅迫下耐熱變異體N1-2-1和母株N1間差異明顯的基因片段,差異率為7.05%,其中41條差異片段來自N1-2-1,其中有6箇片段(DF1~DF6)經過Northern雜交驗證隻在N1-2-1中錶達而在母株N1中不錶達.進一步剋隆測序和數據庫比對分析錶明,DF3和DF4分彆與馬鈴藷和水稻熱脅迫時產生的應答反應有關,其中DF4與熱休剋蛋白HSP70部分序列高度同源,DF3與HSP結閤蛋白部分序列高度同源;DF1與花色素苷轉酰基酶有關,另外3箇(DF2、DF5和DF6)未髮現蛋白質同源序列,推測為新的cDNA片段.
응용mRNA차이현시기술(DDRT-PCR),대과협국(Senecio×hybridus)리체사선획득적내열변이체N1-2-1급기모주N1재열협박하적기인차이표체진행분석.결과현시,종40대인물중공확증출1 419조,사선도100조재열협박하내열변이체N1-2-1화모주N1간차이명현적기인편단,차이솔위7.05%,기중41조차이편단래자N1-2-1,기중유6개편단(DF1~DF6)경과Northern잡교험증지재N1-2-1중표체이재모주N1중불표체.진일보극륭측서화수거고비대분석표명,DF3화DF4분별여마령서화수도열협박시산생적응답반응유관,기중DF4여열휴극단백HSP70부분서렬고도동원,DF3여HSP결합단백부분서렬고도동원;DF1여화색소감전선기매유관,령외3개(DF2、DF5화DF6)미발현단백질동원서렬,추측위신적cDNA편단.