传感技术学报
傳感技術學報
전감기술학보
Journal of Transduction Technology
2008年
2期
203-206
,共4页
雷银花%王玮%王海滨%李志宏
雷銀花%王瑋%王海濱%李誌宏
뢰은화%왕위%왕해빈%리지굉
硅抑制作用%聚合酶链式反应%实时定量PCR
硅抑製作用%聚閤酶鏈式反應%實時定量PCR
규억제작용%취합매련식반응%실시정량PCR
采用实时定量PCR的方法研究了硅表面对乙肝病毒(HBV)DNA扩增过程的抑制作用.实验中采用HF处理的H终止硅和与自然氧化的硅片作为样品,按照1.0 mm2/μL和5.2 mm2/μL的面体比(硅片总表面积与PCR反应液的体积之比)与PCR反应液预混合(未加DNA样品,同时,Taq DNA聚合酶的浓度分别为0.2 U/35μL和1.0 U/35μL),充分混合预设的时间后,取出硅片,汲取上清液与DNA样品混合后采用实时定量PCR仪SIanTM进行扩增.扩增结果的荧光曲线表明:自然氧化的硅样品对PCR抑制作用更强,其对Taq聚合酶的抑制效果大于4.4 mU/mmz;高面体比条件下,即使在初始扩增阶段,也达不到理想的指数形式;缩短芯片反应时间有利于降低材料对扩增的抑制效应.
採用實時定量PCR的方法研究瞭硅錶麵對乙肝病毒(HBV)DNA擴增過程的抑製作用.實驗中採用HF處理的H終止硅和與自然氧化的硅片作為樣品,按照1.0 mm2/μL和5.2 mm2/μL的麵體比(硅片總錶麵積與PCR反應液的體積之比)與PCR反應液預混閤(未加DNA樣品,同時,Taq DNA聚閤酶的濃度分彆為0.2 U/35μL和1.0 U/35μL),充分混閤預設的時間後,取齣硅片,伋取上清液與DNA樣品混閤後採用實時定量PCR儀SIanTM進行擴增.擴增結果的熒光麯線錶明:自然氧化的硅樣品對PCR抑製作用更彊,其對Taq聚閤酶的抑製效果大于4.4 mU/mmz;高麵體比條件下,即使在初始擴增階段,也達不到理想的指數形式;縮短芯片反應時間有利于降低材料對擴增的抑製效應.
채용실시정량PCR적방법연구료규표면대을간병독(HBV)DNA확증과정적억제작용.실험중채용HF처리적H종지규화여자연양화적규편작위양품,안조1.0 mm2/μL화5.2 mm2/μL적면체비(규편총표면적여PCR반응액적체적지비)여PCR반응액예혼합(미가DNA양품,동시,Taq DNA취합매적농도분별위0.2 U/35μL화1.0 U/35μL),충분혼합예설적시간후,취출규편,급취상청액여DNA양품혼합후채용실시정량PCR의SIanTM진행확증.확증결과적형광곡선표명:자연양화적규양품대PCR억제작용경강,기대Taq취합매적억제효과대우4.4 mU/mmz;고면체비조건하,즉사재초시확증계단,야체불도이상적지수형식;축단심편반응시간유리우강저재료대확증적억제효응.