中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2008年
8期
641-646
,共6页
YANG Jing-sheng%喻刚%HU Yong%全家妩
YANG Jing-sheng%喻剛%HU Yong%全傢嫵
YANG Jing-sheng%유강%HU Yong%전가무
人白细胞介素-18%突变体%筛选%活性
人白細胞介素-18%突變體%篩選%活性
인백세포개소-18%돌변체%사선%활성
目的 筛选合适的人白细胞介素-18(hlL-18)突变体,并检测其活性.方法 运用分子模建工具,模建出IL-18受体及IL-18/IL-18R复合物的分子结构,分别虚拟突变IL-18的4个半胱氨酸为另外19种氨基酸,以野生型IL-18为模板进行同源模建,建立其三维结构模型,计算其IL-18/IL-18R复合物三维结构及分子间作用能变化情况,筛选几种突变方案.运用分子生物学技术构建突变体,表达纯化后进行活性检测.结果 根据理论预测情况,筛选了12株突变体.突变的质粒经双酶切及测序鉴定,证明构建正确.突变体蛋白以包涵体形式表达,表达量约占菌体总蛋白的30%,纯化后纯度大于90%.纯化的C38Glu、C127Ser等几株突变体在低浓度时,活性轻微上升,与理论预测结果基本相同.结论 已成功构建了多株IL-18的突变体,运用生物信息学方法进行先期筛选有助于加快IL-18的突变研究.
目的 篩選閤適的人白細胞介素-18(hlL-18)突變體,併檢測其活性.方法 運用分子模建工具,模建齣IL-18受體及IL-18/IL-18R複閤物的分子結構,分彆虛擬突變IL-18的4箇半胱氨痠為另外19種氨基痠,以野生型IL-18為模闆進行同源模建,建立其三維結構模型,計算其IL-18/IL-18R複閤物三維結構及分子間作用能變化情況,篩選幾種突變方案.運用分子生物學技術構建突變體,錶達純化後進行活性檢測.結果 根據理論預測情況,篩選瞭12株突變體.突變的質粒經雙酶切及測序鑒定,證明構建正確.突變體蛋白以包涵體形式錶達,錶達量約佔菌體總蛋白的30%,純化後純度大于90%.純化的C38Glu、C127Ser等幾株突變體在低濃度時,活性輕微上升,與理論預測結果基本相同.結論 已成功構建瞭多株IL-18的突變體,運用生物信息學方法進行先期篩選有助于加快IL-18的突變研究.
목적 사선합괄적인백세포개소-18(hlL-18)돌변체,병검측기활성.방법 운용분자모건공구,모건출IL-18수체급IL-18/IL-18R복합물적분자결구,분별허의돌변IL-18적4개반광안산위령외19충안기산,이야생형IL-18위모판진행동원모건,건립기삼유결구모형,계산기IL-18/IL-18R복합물삼유결구급분자간작용능변화정황,사선궤충돌변방안.운용분자생물학기술구건돌변체,표체순화후진행활성검측.결과 근거이론예측정황,사선료12주돌변체.돌변적질립경쌍매절급측서감정,증명구건정학.돌변체단백이포함체형식표체,표체량약점균체총단백적30%,순화후순도대우90%.순화적C38Glu、C127Ser등궤주돌변체재저농도시,활성경미상승,여이론예측결과기본상동.결론 이성공구건료다주IL-18적돌변체,운용생물신식학방법진행선기사선유조우가쾌IL-18적돌변연구.
