解剖学杂志
解剖學雜誌
해부학잡지
CHINESE JOURNAL OF ANATOMY
2010年
4期
446-450
,共5页
曹利仙%潘巍巍%黄玉蓉%张欣怡%康燕琴
曹利仙%潘巍巍%黃玉蓉%張訢怡%康燕琴
조리선%반외외%황옥용%장흔이%강연금
人半翼基因%短发夹 RNA%细胞转染
人半翼基因%短髮夾 RNA%細胞轉染
인반익기인%단발협 RNA%세포전염
目的:构建针对人半翼基因(hWAPL)的短发夹RNA(shRNA)真核表达载体,并观察其转染效率.方法:根据hWAPL基因序列,设计并合成特异性的小干扰片段,将其定向克隆到带有卡那抗性和增强绿色荧光蛋白的真核表达载体pGenesil-1中,酶切和测序后,用脂质体转染到CasKi细胞中,观察荧光表达,鉴定转染效率.RT-PCR检测结果表明,筛选到的短链hWAPL siRNA能有效抑制内源hWAPL的表达.结果:成功构建了表达shRNA的质粒及其阴性对照质粒,转染到CasKi细胞系中可以特异下调hWAPL mRNA表达,载体转染效率达50%以上.结论:RNAi能特异地下调CasKi细胞中hWAPL mRNA含量,抑制宫颈癌细胞恶性增殖,提示hWAPL可能成为宫颈癌基因治疗的一个新的靶点.
目的:構建針對人半翼基因(hWAPL)的短髮夾RNA(shRNA)真覈錶達載體,併觀察其轉染效率.方法:根據hWAPL基因序列,設計併閤成特異性的小榦擾片段,將其定嚮剋隆到帶有卡那抗性和增彊綠色熒光蛋白的真覈錶達載體pGenesil-1中,酶切和測序後,用脂質體轉染到CasKi細胞中,觀察熒光錶達,鑒定轉染效率.RT-PCR檢測結果錶明,篩選到的短鏈hWAPL siRNA能有效抑製內源hWAPL的錶達.結果:成功構建瞭錶達shRNA的質粒及其陰性對照質粒,轉染到CasKi細胞繫中可以特異下調hWAPL mRNA錶達,載體轉染效率達50%以上.結論:RNAi能特異地下調CasKi細胞中hWAPL mRNA含量,抑製宮頸癌細胞噁性增殖,提示hWAPL可能成為宮頸癌基因治療的一箇新的靶點.
목적:구건침대인반익기인(hWAPL)적단발협RNA(shRNA)진핵표체재체,병관찰기전염효솔.방법:근거hWAPL기인서렬,설계병합성특이성적소간우편단,장기정향극륭도대유잡나항성화증강록색형광단백적진핵표체재체pGenesil-1중,매절화측서후,용지질체전염도CasKi세포중,관찰형광표체,감정전염효솔.RT-PCR검측결과표명,사선도적단련hWAPL siRNA능유효억제내원hWAPL적표체.결과:성공구건료표체shRNA적질립급기음성대조질립,전염도CasKi세포계중가이특이하조hWAPL mRNA표체,재체전염효솔체50%이상.결론:RNAi능특이지하조CasKi세포중hWAPL mRNA함량,억제궁경암세포악성증식,제시hWAPL가능성위궁경암기인치료적일개신적파점.
