中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2011年
14期
2491-2494
,共4页
范敬静%李东良%何秀华%程变巧%马明%张志强
範敬靜%李東良%何秀華%程變巧%馬明%張誌彊
범경정%리동량%하수화%정변교%마명%장지강
肝样细胞%骨髓间充质干细胞%细胞分化%肝细胞生长因子%成纤维生长因子4
肝樣細胞%骨髓間充質榦細胞%細胞分化%肝細胞生長因子%成纖維生長因子4
간양세포%골수간충질간세포%세포분화%간세포생장인자%성섬유생장인자4
背景:研究表明,在体外提供肝细胞及成纤维细胞生长因子等多种因子可诱导骨髓间充质干细胞向肝样细胞分化,但对其诱导的最佳环境还处于摸索阶段.目的:观察体外应用肝细胞生长因子和成纤维生长因子4等多种因子联合诱导骨髓间充质干细胞向肝样细胞的分化能力.方法:采用全骨髓贴壁培养法分离、扩增大鼠骨髓间充质干细胞,培养第3代时用肝细胞生长因子、成纤维生长因子4、胰岛素铁硒传递蛋白及地塞米松等联合诱导其向肝样细胞的分化.于诱导7,14,21 d后观察细胞形态变化,RT-PCR检测细胞白蛋白、甲胎蛋白、细胞角蛋白的mRNA表达;于诱导14,21 d行PAS糖原染色检测,并采用免疫细胞荧光法检测细胞白蛋白表达.结果与结论:随着诱导时间的延长,骨髓间充质干细胞表现为肝细胞样,并呈集落生长,肝细胞特异性标志物逐渐出现和成熟.细胞诱导至7 d出现甲胎蛋白mRNA表达,14 d表达增高,21 d时表达下降;14 d时细胞角蛋白18、白蛋白 mRNA和糖原出现表达,并随时间延长表达逐渐增加.细胞诱导14 d时,胞浆白蛋白出现表达,至21 d时表达增强.证实骨髓间充质干细胞在肝细胞生长因子、成纤维生长因子4等多种因子诱导作用下,具有强大的向肝细胞分化能力.
揹景:研究錶明,在體外提供肝細胞及成纖維細胞生長因子等多種因子可誘導骨髓間充質榦細胞嚮肝樣細胞分化,但對其誘導的最佳環境還處于摸索階段.目的:觀察體外應用肝細胞生長因子和成纖維生長因子4等多種因子聯閤誘導骨髓間充質榦細胞嚮肝樣細胞的分化能力.方法:採用全骨髓貼壁培養法分離、擴增大鼠骨髓間充質榦細胞,培養第3代時用肝細胞生長因子、成纖維生長因子4、胰島素鐵硒傳遞蛋白及地塞米鬆等聯閤誘導其嚮肝樣細胞的分化.于誘導7,14,21 d後觀察細胞形態變化,RT-PCR檢測細胞白蛋白、甲胎蛋白、細胞角蛋白的mRNA錶達;于誘導14,21 d行PAS糖原染色檢測,併採用免疫細胞熒光法檢測細胞白蛋白錶達.結果與結論:隨著誘導時間的延長,骨髓間充質榦細胞錶現為肝細胞樣,併呈集落生長,肝細胞特異性標誌物逐漸齣現和成熟.細胞誘導至7 d齣現甲胎蛋白mRNA錶達,14 d錶達增高,21 d時錶達下降;14 d時細胞角蛋白18、白蛋白 mRNA和糖原齣現錶達,併隨時間延長錶達逐漸增加.細胞誘導14 d時,胞漿白蛋白齣現錶達,至21 d時錶達增彊.證實骨髓間充質榦細胞在肝細胞生長因子、成纖維生長因子4等多種因子誘導作用下,具有彊大的嚮肝細胞分化能力.
배경:연구표명,재체외제공간세포급성섬유세포생장인자등다충인자가유도골수간충질간세포향간양세포분화,단대기유도적최가배경환처우모색계단.목적:관찰체외응용간세포생장인자화성섬유생장인자4등다충인자연합유도골수간충질간세포향간양세포적분화능력.방법:채용전골수첩벽배양법분리、확증대서골수간충질간세포,배양제3대시용간세포생장인자、성섬유생장인자4、이도소철서전체단백급지새미송등연합유도기향간양세포적분화.우유도7,14,21 d후관찰세포형태변화,RT-PCR검측세포백단백、갑태단백、세포각단백적mRNA표체;우유도14,21 d행PAS당원염색검측,병채용면역세포형광법검측세포백단백표체.결과여결론:수착유도시간적연장,골수간충질간세포표현위간세포양,병정집락생장,간세포특이성표지물축점출현화성숙.세포유도지7 d출현갑태단백mRNA표체,14 d표체증고,21 d시표체하강;14 d시세포각단백18、백단백 mRNA화당원출현표체,병수시간연장표체축점증가.세포유도14 d시,포장백단백출현표체,지21 d시표체증강.증실골수간충질간세포재간세포생장인자、성섬유생장인자4등다충인자유도작용하,구유강대적향간세포분화능력.