国际检验医学杂志
國際檢驗醫學雜誌
국제검험의학잡지
INTERNATIONAL JOURNAL OF LABORATORY MEDICINE
2011年
18期
2051-2054
,共4页
周刚%邱大卫%秦大江%牛立志%蔡金蕾%何丽华%黄文浩%徐克成
週剛%邱大衛%秦大江%牛立誌%蔡金蕾%何麗華%黃文浩%徐剋成
주강%구대위%진대강%우립지%채금뢰%하려화%황문호%서극성
聚合酶链反应%胰腺癌%CD44v6
聚閤酶鏈反應%胰腺癌%CD44v6
취합매련반응%이선암%CD44v6
目的 建立一种敏感、特异的二重TaqMan实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)方法,定量检测CD44v6基因在胰腺癌患者中的mRNA表达水平.方法 设计目的 基因CD44v6和内参基因β-actin的引物与探针并构建两者的重组质粒,通过优化反应条件,建立二重qRT-PCR方法的标准曲线,并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行评估.应用该方法定量检测18例胰腺癌患者外周血单核细胞(PBMC)中CD44v6 mRNA的表达水平.结果 成功了构建该方法的标准曲线,其特异性较高,重复性良好,CD44v6和β-actin基因的检测下限均达到100 copy/μL,是常规RT-PCR的10倍,7例胰腺癌患者百万PBMC中CD44v6表达量的对数值为3.4～3.9,另9例为3.9～4.9,仅2例在5.0以上.结论 本研究建立的二重qRT-PCR方法可定量检测CD44v6基因的表达水平,并对试验个体及试验组的CD44v6 表达水平进行比较,从而为胰腺癌的诊断、预后及治疗效果的评估提供了有效的手段.
目的 建立一種敏感、特異的二重TaqMan實時熒光定量RT-PCR(qRT-PCR)方法,定量檢測CD44v6基因在胰腺癌患者中的mRNA錶達水平.方法 設計目的 基因CD44v6和內參基因β-actin的引物與探針併構建兩者的重組質粒,通過優化反應條件,建立二重qRT-PCR方法的標準麯線,併對該方法的特異性、敏感性和重複性進行評估.應用該方法定量檢測18例胰腺癌患者外週血單覈細胞(PBMC)中CD44v6 mRNA的錶達水平.結果 成功瞭構建該方法的標準麯線,其特異性較高,重複性良好,CD44v6和β-actin基因的檢測下限均達到100 copy/μL,是常規RT-PCR的10倍,7例胰腺癌患者百萬PBMC中CD44v6錶達量的對數值為3.4～3.9,另9例為3.9～4.9,僅2例在5.0以上.結論 本研究建立的二重qRT-PCR方法可定量檢測CD44v6基因的錶達水平,併對試驗箇體及試驗組的CD44v6 錶達水平進行比較,從而為胰腺癌的診斷、預後及治療效果的評估提供瞭有效的手段.
목적 건립일충민감、특이적이중TaqMan실시형광정량RT-PCR(qRT-PCR)방법,정량검측CD44v6기인재이선암환자중적mRNA표체수평.방법 설계목적 기인CD44v6화내삼기인β-actin적인물여탐침병구건량자적중조질립,통과우화반응조건,건립이중qRT-PCR방법적표준곡선,병대해방법적특이성、민감성화중복성진행평고.응용해방법정량검측18례이선암환자외주혈단핵세포(PBMC)중CD44v6 mRNA적표체수평.결과 성공료구건해방법적표준곡선,기특이성교고,중복성량호,CD44v6화β-actin기인적검측하한균체도100 copy/μL,시상규RT-PCR적10배,7례이선암환자백만PBMC중CD44v6표체량적대수치위3.4～3.9,령9례위3.9～4.9,부2례재5.0이상.결론 본연구건립적이중qRT-PCR방법가정량검측CD44v6기인적표체수평,병대시험개체급시험조적CD44v6 표체수평진행비교,종이위이선암적진단、예후급치료효과적평고제공료유효적수단.
