实用儿科临床杂志
實用兒科臨床雜誌
실용인과림상잡지
Journal of Applied Clinical Pediatrics
2012年
10期
766-768,794
,共4页
王颖超%殷楚云%冯磊%赵小明%王晓晖%徐彦磊
王穎超%慇楚雲%馮磊%趙小明%王曉暉%徐彥磊
왕영초%은초운%풍뢰%조소명%왕효휘%서언뢰
脐血%造血干细胞%分离%间充质干细胞
臍血%造血榦細胞%分離%間充質榦細胞
제혈%조혈간세포%분리%간충질간세포
目的 探讨一种较好的脐血造血干细胞(HSCs)的分离方法,以最大限度地分离出脐血中的HSCs,使其以高纯度、最佳生长状态用于治疗和研究.方法 取本院足月妊娠健康产妇的脐血20份,每份均采用羟乙基淀粉沉淀(HES)法、淋巴细胞分离液( Ficoll)密度梯度离心法、免疫磁珠(MACS)法处理.比较3种方法分离后的单个核细胞(MNCs)回收率、锥虫蓝拒染率及CD34细胞阳性率；将以上3种方法所得细胞用完全培养基培养,不同时间点计数细胞,绘制生长曲线,并观察原代细胞的生长情况及其形态特征；并采用半固体琼脂培养法,计数其粒-巨噬细胞集落形成单位数.结果 HES法得到的MNCs回收率高于Ficoll密度梯度离心法和MACS法(Pa＜0.05)；锥虫蓝拒染率三者比较差异无统计学意义(P＞0.05)；MACS法所得细胞CD34阳性率明显高于另2种方法(Pa＜0.05),并且其所得细胞生长状态好,集落数最多；HES法和Ficoll法所得细胞,部分呈贴壁生长,与贴壁细胞共培养的细胞生长状态好；Ficon密度梯度离心法得到细胞生长状态最差,集落数最少.结论 HES法可作为一种首选常规分离脐血造血干细胞的方法；MACS法分离得到造血干细胞纯度高,适于实验及临床研究.
目的 探討一種較好的臍血造血榦細胞(HSCs)的分離方法,以最大限度地分離齣臍血中的HSCs,使其以高純度、最佳生長狀態用于治療和研究.方法 取本院足月妊娠健康產婦的臍血20份,每份均採用羥乙基澱粉沉澱(HES)法、淋巴細胞分離液( Ficoll)密度梯度離心法、免疫磁珠(MACS)法處理.比較3種方法分離後的單箇覈細胞(MNCs)迴收率、錐蟲藍拒染率及CD34細胞暘性率；將以上3種方法所得細胞用完全培養基培養,不同時間點計數細胞,繪製生長麯線,併觀察原代細胞的生長情況及其形態特徵；併採用半固體瓊脂培養法,計數其粒-巨噬細胞集落形成單位數.結果 HES法得到的MNCs迴收率高于Ficoll密度梯度離心法和MACS法(Pa＜0.05)；錐蟲藍拒染率三者比較差異無統計學意義(P＞0.05)；MACS法所得細胞CD34暘性率明顯高于另2種方法(Pa＜0.05),併且其所得細胞生長狀態好,集落數最多；HES法和Ficoll法所得細胞,部分呈貼壁生長,與貼壁細胞共培養的細胞生長狀態好；Ficon密度梯度離心法得到細胞生長狀態最差,集落數最少.結論 HES法可作為一種首選常規分離臍血造血榦細胞的方法；MACS法分離得到造血榦細胞純度高,適于實驗及臨床研究.
목적 탐토일충교호적제혈조혈간세포(HSCs)적분리방법,이최대한도지분리출제혈중적HSCs,사기이고순도、최가생장상태용우치료화연구.방법 취본원족월임신건강산부적제혈20빈,매빈균채용간을기정분침정(HES)법、림파세포분리액( Ficoll)밀도제도리심법、면역자주(MACS)법처리.비교3충방법분리후적단개핵세포(MNCs)회수솔、추충람거염솔급CD34세포양성솔；장이상3충방법소득세포용완전배양기배양,불동시간점계수세포,회제생장곡선,병관찰원대세포적생장정황급기형태특정；병채용반고체경지배양법,계수기립-거서세포집락형성단위수.결과 HES법득도적MNCs회수솔고우Ficoll밀도제도리심법화MACS법(Pa＜0.05)；추충람거염솔삼자비교차이무통계학의의(P＞0.05)；MACS법소득세포CD34양성솔명현고우령2충방법(Pa＜0.05),병차기소득세포생장상태호,집락수최다；HES법화Ficoll법소득세포,부분정첩벽생장,여첩벽세포공배양적세포생장상태호；Ficon밀도제도리심법득도세포생장상태최차,집락수최소.결론 HES법가작위일충수선상규분리제혈조혈간세포적방법；MACS법분리득도조혈간세포순도고,괄우실험급림상연구.
