中华微生物学和免疫学杂志
中華微生物學和免疫學雜誌
중화미생물학화면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
2007年
9期
802-806
,共5页
谷超%陈锦英%侯敏%贺靖冬%畅继武
穀超%陳錦英%侯敏%賀靖鼕%暢繼武
곡초%진금영%후민%하정동%창계무
致肾盂肾炎大肠杆菌%人肾盂上皮原代细胞%原代培养%黏附%毒力基因
緻腎盂腎炎大腸桿菌%人腎盂上皮原代細胞%原代培養%黏附%毒力基因
치신우신염대장간균%인신우상피원대세포%원대배양%점부%독력기인
目的 建立人肾盂上皮原代细胞的培养方法,用于致肾盂肾炎大肠杆菌(UPEC)黏附作用的研究.方法 利用复合PCR方法检测UPEC 132菌株毒力基因hly和cnf1.采集人肾脏手术标本,利用组织块法取肾盂正常上皮组织,使用添加EGF及BPE的角朊细胞无血清培养基(K-SFM)进行原代细胞培养,经HE染色和免疫细胞化学染色进行鉴定.鉴定符合要求的人肾盂上皮原代细胞用于UPEC黏附试验,分别于不同作用时间观察黏附后细胞形态学变化,并计算黏附率和黏附指数.结果 此研究制备的人肾盂上皮原代细胞具备移行上皮细胞特征.带有毒力基因hly和cnf1的UPEC132菌株作用于人肾盂上皮原代细胞,15 min后细菌开始黏附,120 min达到高峰,黏附率为74.4%,黏附指数为34.0.显微镜下观察细胞形变、着色不均,胞浆和胞核都有改变.结论 人肾盂上皮原代细胞可用于UPEC的黏附试验,为其致病机理的深入研究奠定基础.
目的 建立人腎盂上皮原代細胞的培養方法,用于緻腎盂腎炎大腸桿菌(UPEC)黏附作用的研究.方法 利用複閤PCR方法檢測UPEC 132菌株毒力基因hly和cnf1.採集人腎髒手術標本,利用組織塊法取腎盂正常上皮組織,使用添加EGF及BPE的角朊細胞無血清培養基(K-SFM)進行原代細胞培養,經HE染色和免疫細胞化學染色進行鑒定.鑒定符閤要求的人腎盂上皮原代細胞用于UPEC黏附試驗,分彆于不同作用時間觀察黏附後細胞形態學變化,併計算黏附率和黏附指數.結果 此研究製備的人腎盂上皮原代細胞具備移行上皮細胞特徵.帶有毒力基因hly和cnf1的UPEC132菌株作用于人腎盂上皮原代細胞,15 min後細菌開始黏附,120 min達到高峰,黏附率為74.4%,黏附指數為34.0.顯微鏡下觀察細胞形變、著色不均,胞漿和胞覈都有改變.結論 人腎盂上皮原代細胞可用于UPEC的黏附試驗,為其緻病機理的深入研究奠定基礎.
목적 건립인신우상피원대세포적배양방법,용우치신우신염대장간균(UPEC)점부작용적연구.방법 이용복합PCR방법검측UPEC 132균주독력기인hly화cnf1.채집인신장수술표본,이용조직괴법취신우정상상피조직,사용첨가EGF급BPE적각원세포무혈청배양기(K-SFM)진행원대세포배양,경HE염색화면역세포화학염색진행감정.감정부합요구적인신우상피원대세포용우UPEC점부시험,분별우불동작용시간관찰점부후세포형태학변화,병계산점부솔화점부지수.결과 차연구제비적인신우상피원대세포구비이행상피세포특정.대유독력기인hly화cnf1적UPEC132균주작용우인신우상피원대세포,15 min후세균개시점부,120 min체도고봉,점부솔위74.4%,점부지수위34.0.현미경하관찰세포형변、착색불균,포장화포핵도유개변.결론 인신우상피원대세포가용우UPEC적점부시험,위기치병궤리적심입연구전정기출.
