CAJ | 학술논문

目的:进一步研究血栓形成的机制,开发抗血栓药物.方法: 应用基因重组技术在大肠杆菌中表达人vWF-A1区蛋白,经过纯化、复性,获得重组蛋白(rvWF-A1),同时用流式细胞术检测rvWF-A1与血小板膜糖蛋白血小板膜糖蛋白(glycoprotein, GP)Ib的结合能力,应用血小板聚集仪测定rvWF-A1对瑞斯托霉素(ristocetin)诱导的血小板聚集抑制作用.结果: 重组表达载体pQE-31-vWF-A1在大肠杆菌M15中得到高效表达,表达的重组蛋白量占菌体总蛋白的30%,Ni-NTA agrose柱纯化后,其纯度为95%,经复性的rvWF-A1蛋白具有良好的生物学活性.它可与血小板模糖蛋白血小板膜糖蛋白GPIb结合,阳性率为78.6%;它可以抑制ristocetin诱导的血小板聚集,抑制率为84.7%.结论: 在原核细胞中可以成功地高效表达人vWF-A1区蛋白,该重组蛋白有可能开发为有效的抗血栓药物.
목적:진일보연구혈전형성적궤제,개발항혈전약물.방법: 응용기인중조기술재대장간균중표체인vWF-A1구단백,경과순화、복성,획득중조단백(rvWF-A1),동시용류식세포술검측rvWF-A1여혈소판막당단백혈소판막당단백(glycoprotein, GP)Ib적결합능력,응용혈소판취집의측정rvWF-A1대서사탁매소(ristocetin)유도적혈소판취집억제작용.결과: 중조표체재체pQE-31-vWF-A1재대장간균M15중득도고효표체,표체적중조단백량점균체총단백적30%,Ni-NTA agrose주순화후,기순도위95%,경복성적rvWF-A1단백구유량호적생물학활성.타가여혈소판모당단백혈소판막당단백GPIb결합,양성솔위78.6%;타가이억제ristocetin유도적혈소판취집,억제솔위84.7%.결론: 재원핵세포중가이성공지고효표체인vWF-A1구단백,해중조단백유가능개발위유효적항혈전약물.