首都医科大学学报
首都醫科大學學報
수도의과대학학보
JOURNAL OF CAPITAL UNIVERSITY OF MEDICAL SCIENCES
2005年
2期
159-162
,共4页
孙丽翠%祁雅慧%张静宜%闫豫东%殷红
孫麗翠%祁雅慧%張靜宜%閆豫東%慇紅
손려취%기아혜%장정의%염예동%은홍
EGFP%MAR%基因表达调控
EGFP%MAR%基因錶達調控
EGFP%MAR%기인표체조공
目的研究dMAR对EGFP基因表达的调控作用.方法用Kpn I酶切pGFP/MAR,回收含MAR下游850bp的片段dMAR,与Kpn I酶切回收的pEGFP-C1载体连接,Hind Ⅲ酶切鉴定方向,构建正向、反向连接的真核表达载体pEGFP/dMAR′和pEGFP/dMAR.将该表达载体转染COS7细胞,荧光显微镜观察EGFP的表达并采用流式细胞术进行荧光定量.结果 pEGFP-C1,pEGFP/dMAR′和pEGFP/dMAR转染后48 h EGFP的表达量分别为45.1%、40.5%和11.3%.结论 pEGFP/dMAR显著抑制了EGFP的表达,pEGFP/dMAR′的增强表达作用不明显.
目的研究dMAR對EGFP基因錶達的調控作用.方法用Kpn I酶切pGFP/MAR,迴收含MAR下遊850bp的片段dMAR,與Kpn I酶切迴收的pEGFP-C1載體連接,Hind Ⅲ酶切鑒定方嚮,構建正嚮、反嚮連接的真覈錶達載體pEGFP/dMAR′和pEGFP/dMAR.將該錶達載體轉染COS7細胞,熒光顯微鏡觀察EGFP的錶達併採用流式細胞術進行熒光定量.結果 pEGFP-C1,pEGFP/dMAR′和pEGFP/dMAR轉染後48 h EGFP的錶達量分彆為45.1%、40.5%和11.3%.結論 pEGFP/dMAR顯著抑製瞭EGFP的錶達,pEGFP/dMAR′的增彊錶達作用不明顯.
목적연구dMAR대EGFP기인표체적조공작용.방법용Kpn I매절pGFP/MAR,회수함MAR하유850bp적편단dMAR,여Kpn I매절회수적pEGFP-C1재체련접,Hind Ⅲ매절감정방향,구건정향、반향련접적진핵표체재체pEGFP/dMAR′화pEGFP/dMAR.장해표체재체전염COS7세포,형광현미경관찰EGFP적표체병채용류식세포술진행형광정량.결과 pEGFP-C1,pEGFP/dMAR′화pEGFP/dMAR전염후48 h EGFP적표체량분별위45.1%、40.5%화11.3%.결론 pEGFP/dMAR현저억제료EGFP적표체,pEGFP/dMAR′적증강표체작용불명현.
