细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2005年
3期
325-327
,共3页
杨敬%丁天兵%任君萍%宋建华%马文煜
楊敬%丁天兵%任君萍%宋建華%馬文煜
양경%정천병%임군평%송건화%마문욱
单克隆抗体%μ链%杂交瘤%ELISA
單剋隆抗體%μ鏈%雜交瘤%ELISA
단극륭항체%μ련%잡교류%ELISA
目的:制备高效价的鼠源性抗人μ链单克隆抗体(mAb),并建立可用于感染性疾病早期血清学诊断的ELISA捕捉法.方法:以人IgM全分子免疫BALB/c小鼠,按常规方法进行细胞融合,用间接ELISA法筛选及克隆化,建立可稳定分泌抗μ链mAb的杂交瘤细胞株.mAb的特性(效价、Ig亚类、特异性及相对亲和力)采用ELISA及Western blot法鉴定.以纯化的mAb包被建立ELISA捕捉法,并用于可疑乙脑患者标本中特异性IgM抗体的检测.结果:筛选到1株可稳定分泌抗人μ链mAb的细胞株2E5.mAb腹水的ELISA效价为1×10-6,Ig亚类(型)为IgGl(κ),相对亲和力为1×10-5.Western blot结果显示mAb2E5仅与IgM的μ链结合,Mr为75000.以辛酸-硫酸铵法纯化的mAb2E5包被,建立了ELISA捕捉法,用于30份乙脑患者血清IgM的检测,敏感性及特异性良好.结论:成功地制备1株抗人μ链mAb2E5,建立了可用于感染性疾病早期血清学诊断的ELISA捕捉法.
目的:製備高效價的鼠源性抗人μ鏈單剋隆抗體(mAb),併建立可用于感染性疾病早期血清學診斷的ELISA捕捉法.方法:以人IgM全分子免疫BALB/c小鼠,按常規方法進行細胞融閤,用間接ELISA法篩選及剋隆化,建立可穩定分泌抗μ鏈mAb的雜交瘤細胞株.mAb的特性(效價、Ig亞類、特異性及相對親和力)採用ELISA及Western blot法鑒定.以純化的mAb包被建立ELISA捕捉法,併用于可疑乙腦患者標本中特異性IgM抗體的檢測.結果:篩選到1株可穩定分泌抗人μ鏈mAb的細胞株2E5.mAb腹水的ELISA效價為1×10-6,Ig亞類(型)為IgGl(κ),相對親和力為1×10-5.Western blot結果顯示mAb2E5僅與IgM的μ鏈結閤,Mr為75000.以辛痠-硫痠銨法純化的mAb2E5包被,建立瞭ELISA捕捉法,用于30份乙腦患者血清IgM的檢測,敏感性及特異性良好.結論:成功地製備1株抗人μ鏈mAb2E5,建立瞭可用于感染性疾病早期血清學診斷的ELISA捕捉法.
목적:제비고효개적서원성항인μ련단극륭항체(mAb),병건립가용우감염성질병조기혈청학진단적ELISA포착법.방법:이인IgM전분자면역BALB/c소서,안상규방법진행세포융합,용간접ELISA법사선급극륭화,건립가은정분비항μ련mAb적잡교류세포주.mAb적특성(효개、Ig아류、특이성급상대친화력)채용ELISA급Western blot법감정.이순화적mAb포피건립ELISA포착법,병용우가의을뇌환자표본중특이성IgM항체적검측.결과:사선도1주가은정분비항인μ련mAb적세포주2E5.mAb복수적ELISA효개위1×10-6,Ig아류(형)위IgGl(κ),상대친화력위1×10-5.Western blot결과현시mAb2E5부여IgM적μ련결합,Mr위75000.이신산-류산안법순화적mAb2E5포피,건립료ELISA포착법,용우30빈을뇌환자혈청IgM적검측,민감성급특이성량호.결론:성공지제비1주항인μ련mAb2E5,건립료가용우감염성질병조기혈청학진단적ELISA포착법.
