农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2006年
4期
526-529
,共4页
谢青梅%李少璃%陈丽%覃健萍%马静云%毕英佐%曹永长
謝青梅%李少璃%陳麗%覃健萍%馬靜雲%畢英佐%曹永長
사청매%리소리%진려%담건평%마정운%필영좌%조영장
口蹄疫病毒(FMDV)%VP1基因%高效可溶表达%抗原性
口蹄疫病毒(FMDV)%VP1基因%高效可溶錶達%抗原性
구제역병독(FMDV)%VP1기인%고효가용표체%항원성
将猪源O型口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)VP1基因克隆到原核表达载体pMBX上,成功地构建重组表达质粒pMBX-VP1.将其转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)感受态细胞中,经SDS-PAGE分析,融合蛋白分子量约为58 kD,表达产物占菌体总蛋白的35.5%.经蛋白可溶性分析,目的蛋白在裂解沉淀中占6.8%,在裂解上清中占31.2%,融合蛋白绝大部分是以可溶形式表达的.经Western blot证实,可溶表达的融合蛋白与FMDV阳性血清具有良好的免疫反应性.将可溶表达的融合蛋白用50%Ni-NTA树脂纯化,用融合蛋白作包被抗原,通过ELISA方法,能特异性地检测出口蹄疫阳性血清.
將豬源O型口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)VP1基因剋隆到原覈錶達載體pMBX上,成功地構建重組錶達質粒pMBX-VP1.將其轉化大腸桿菌(Escherichia coli)BL21(DE3)感受態細胞中,經SDS-PAGE分析,融閤蛋白分子量約為58 kD,錶達產物佔菌體總蛋白的35.5%.經蛋白可溶性分析,目的蛋白在裂解沉澱中佔6.8%,在裂解上清中佔31.2%,融閤蛋白絕大部分是以可溶形式錶達的.經Western blot證實,可溶錶達的融閤蛋白與FMDV暘性血清具有良好的免疫反應性.將可溶錶達的融閤蛋白用50%Ni-NTA樹脂純化,用融閤蛋白作包被抗原,通過ELISA方法,能特異性地檢測齣口蹄疫暘性血清.
장저원O형구제역병독(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)VP1기인극륭도원핵표체재체pMBX상,성공지구건중조표체질립pMBX-VP1.장기전화대장간균(Escherichia coli)BL21(DE3)감수태세포중,경SDS-PAGE분석,융합단백분자량약위58 kD,표체산물점균체총단백적35.5%.경단백가용성분석,목적단백재렬해침정중점6.8%,재렬해상청중점31.2%,융합단백절대부분시이가용형식표체적.경Western blot증실,가용표체적융합단백여FMDV양성혈청구유량호적면역반응성.장가용표체적융합단백용50%Ni-NTA수지순화,용융합단백작포피항원,통과ELISA방법,능특이성지검측출구제역양성혈청.
