CAJ | 학술논문

目的:观察脊髓间充质干细胞移植对大鼠脊髓损伤后脑源性神经营养因子表达的影响.方法:实验于2002-06/2003-06在中国医科大学实验动物中心完成.选取3月龄Wistar大鼠64只,随机选4只大鼠取股骨骨髓作骨髓间充质细胞的分离与培养,经过培养、鉴定及传代.其余60只大鼠分成3组制作脊髓横断损伤模型.细胞移植24只,磷酸盐缓冲液组24只,空白对照12只.脊髓损伤后第7天,在无菌条件下,细胞移植组以微量注射器缓慢注入含骨髓间充质干细胞(106/mL)的培养液5 μL,磷酸盐缓冲液组注射注入等量磷酸盐缓冲液5μL,对照组未制作脊髓损伤.分别于术后7 d、14 d、28 d麻醉下行心脏灌流固定取T10节段脊髓,细胞移植组与磷酸盐缓冲液组取出损伤节段的脊髓(8只/时点),空白对照组于同一节段取出相应脊髓(4只/时点).应用免疫组化法观察间充质干细胞移植后,大鼠脊髓损伤区脑源性神经营养因子的表达变化.结果:所有实验动物均全部进入结果分析,术后感染5只,均予补足.①原代间充质干细胞培养:细胞接种24 h后贴壁生长,72 h细胞增殖,有细胞团形成,在传代过程中,4代以前的细胞倍增时间为4～6 d,至10代以后细胞增殖能力有所减弱,胞体变得扁平,若加入碱性成纤维细胞生长因子,则可维持其增殖能力和形态.②脑源性神经营养因子在正常大鼠脊髓组织中有一定表达,移植术后第7天,第14天及第28天,细胞移植组脑源性神经营养因子均高水平表达,与磷酸缓冲液组相比较差别明显.结论:骨髓间充质干细胞移植后可能通过上调脑源性神经营养因子的表达从而促进脊髓损伤区神经元轴突的再生.
목적:관찰척수간충질간세포이식대대서척수손상후뇌원성신경영양인자표체적영향.방법:실험우2002-06/2003-06재중국의과대학실험동물중심완성.선취3월령Wistar대서64지,수궤선4지대서취고골골수작골수간충질세포적분리여배양,경과배양、감정급전대.기여60지대서분성3조제작척수횡단손상모형.세포이식24지,린산염완충액조24지,공백대조12지.척수손상후제7천,재무균조건하,세포이식조이미량주사기완만주입함골수간충질간세포(106/mL)적배양액5 μL,린산염완충액조주사주입등량린산염완충액5μL,대조조미제작척수손상.분별우술후7 d、14 d、28 d마취하행심장관류고정취T10절단척수,세포이식조여린산염완충액조취출손상절단적척수(8지/시점),공백대조조우동일절단취출상응척수(4지/시점).응용면역조화법관찰간충질간세포이식후,대서척수손상구뇌원성신경영양인자적표체변화.결과:소유실험동물균전부진입결과분석,술후감염5지,균여보족.①원대간충질간세포배양:세포접충24 h후첩벽생장,72 h세포증식,유세포단형성,재전대과정중,4대이전적세포배증시간위4～6 d,지10대이후세포증식능력유소감약,포체변득편평,약가입감성성섬유세포생장인자,칙가유지기증식능력화형태.②뇌원성신경영양인자재정상대서척수조직중유일정표체,이식술후제7천,제14천급제28천,세포이식조뇌원성신경영양인자균고수평표체,여린산완충액조상비교차별명현.결론:골수간충질간세포이식후가능통과상조뇌원성신경영양인자적표체종이촉진척수손상구신경원축돌적재생.