中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2007年
14期
2601-2604
,共4页
芮钢%王者生%尤元璋%胡宝山
芮鋼%王者生%尤元璋%鬍寶山
예강%왕자생%우원장%호보산
成骨细胞%内皮细胞%生物相容性材料
成骨細胞%內皮細胞%生物相容性材料
성골세포%내피세포%생물상용성재료
目的:采用自行研制的脱细胞基质猪肋骨作为支架材料,复合兔成骨细胞和血管内皮细胞,对其生物相容性、抗原性和细胞毒性进行观察.方法:实验于2003-04/10在四川大学华西医院人类疾病生物治疗教育部重点实验室完成.用物理、化学方法制备脱细胞基质猪肋骨.体外培养兔成骨细胞、血管内皮细胞.而后将试验分成3组进行.①成骨细胞组:将成骨细胞与脱细胞基质骨材料复合.②血管内皮细胞组:血管内皮细胞与脱细胞基质骨材料复合.③成骨细胞+血管内皮细胞组:成骨细胞+血管内皮细胞与脱细胞基质骨材料复合.④对照组:单纯成骨细胞.于培养1,3,5,7 d分别用倒置相差显微镜、组织学切片和扫描电镜观察脱细胞基质异种骨的生物相容性、抗原性;用流式细胞仪检测材料对细胞周期和DNA含量的影响,了解材料对细胞有无毒性的影响.结果:①脱细胞基质骨扫描电镜观察:脱细胞基质骨的骨小梁结构完整,骨陷窝空虚,未见细胞成分残留.②各组细胞的生长、分化和增殖情况倒置相差显微镜观察:3组细胞与脱细胞基质骨材料复合培养12 h后,细胞在各组材料表面和孔隙内均可黏附和生长.③组织学观察:MASSON染色显示3组细胞在材料表面和孔隙内大量增殖,并分泌细胞外基质.以成骨细胞+血管内皮细胞组材料表面黏附的细胞数量最多.组织学切片染色显示,各组细胞沿材料边缘紧密附着,细胞与材料的组织相容性良好.④各组细胞黏附、生长、增殖和基质分泌情况扫描电镜观察:3组细胞与材料复合培养5 d后,细胞紧密黏附在材料表面.成骨细胞呈梭形或多角形,相邻细胞间有突起相互连接.血管内皮细胞呈椭圆形,有角状突起,与材料附着紧密.其中,成骨细胞+血管内皮细胞组材料表面黏附大量细胞,并有较多胶原形成.血管内皮细胞组材料表面胶原形成很少.⑤细胞周期和DNA含量:成骨细胞+血管内皮细胞组1 d,3 d DNA合成期高于单独细胞组,无异倍体细胞.结论:脱细胞基质骨具有良好的生物相容性、极低的抗原性、无细胞毒性和致瘤性.成骨细胞与血管内皮细胞联合培养细胞在脱细胞基质异种骨中有很强的增殖潜力.
目的:採用自行研製的脫細胞基質豬肋骨作為支架材料,複閤兔成骨細胞和血管內皮細胞,對其生物相容性、抗原性和細胞毒性進行觀察.方法:實驗于2003-04/10在四川大學華西醫院人類疾病生物治療教育部重點實驗室完成.用物理、化學方法製備脫細胞基質豬肋骨.體外培養兔成骨細胞、血管內皮細胞.而後將試驗分成3組進行.①成骨細胞組:將成骨細胞與脫細胞基質骨材料複閤.②血管內皮細胞組:血管內皮細胞與脫細胞基質骨材料複閤.③成骨細胞+血管內皮細胞組:成骨細胞+血管內皮細胞與脫細胞基質骨材料複閤.④對照組:單純成骨細胞.于培養1,3,5,7 d分彆用倒置相差顯微鏡、組織學切片和掃描電鏡觀察脫細胞基質異種骨的生物相容性、抗原性;用流式細胞儀檢測材料對細胞週期和DNA含量的影響,瞭解材料對細胞有無毒性的影響.結果:①脫細胞基質骨掃描電鏡觀察:脫細胞基質骨的骨小樑結構完整,骨陷窩空虛,未見細胞成分殘留.②各組細胞的生長、分化和增殖情況倒置相差顯微鏡觀察:3組細胞與脫細胞基質骨材料複閤培養12 h後,細胞在各組材料錶麵和孔隙內均可黏附和生長.③組織學觀察:MASSON染色顯示3組細胞在材料錶麵和孔隙內大量增殖,併分泌細胞外基質.以成骨細胞+血管內皮細胞組材料錶麵黏附的細胞數量最多.組織學切片染色顯示,各組細胞沿材料邊緣緊密附著,細胞與材料的組織相容性良好.④各組細胞黏附、生長、增殖和基質分泌情況掃描電鏡觀察:3組細胞與材料複閤培養5 d後,細胞緊密黏附在材料錶麵.成骨細胞呈梭形或多角形,相鄰細胞間有突起相互連接.血管內皮細胞呈橢圓形,有角狀突起,與材料附著緊密.其中,成骨細胞+血管內皮細胞組材料錶麵黏附大量細胞,併有較多膠原形成.血管內皮細胞組材料錶麵膠原形成很少.⑤細胞週期和DNA含量:成骨細胞+血管內皮細胞組1 d,3 d DNA閤成期高于單獨細胞組,無異倍體細胞.結論:脫細胞基質骨具有良好的生物相容性、極低的抗原性、無細胞毒性和緻瘤性.成骨細胞與血管內皮細胞聯閤培養細胞在脫細胞基質異種骨中有很彊的增殖潛力.
목적:채용자행연제적탈세포기질저륵골작위지가재료,복합토성골세포화혈관내피세포,대기생물상용성、항원성화세포독성진행관찰.방법:실험우2003-04/10재사천대학화서의원인류질병생물치료교육부중점실험실완성.용물리、화학방법제비탈세포기질저륵골.체외배양토성골세포、혈관내피세포.이후장시험분성3조진행.①성골세포조:장성골세포여탈세포기질골재료복합.②혈관내피세포조:혈관내피세포여탈세포기질골재료복합.③성골세포+혈관내피세포조:성골세포+혈관내피세포여탈세포기질골재료복합.④대조조:단순성골세포.우배양1,3,5,7 d분별용도치상차현미경、조직학절편화소묘전경관찰탈세포기질이충골적생물상용성、항원성;용류식세포의검측재료대세포주기화DNA함량적영향,료해재료대세포유무독성적영향.결과:①탈세포기질골소묘전경관찰:탈세포기질골적골소량결구완정,골함와공허,미견세포성분잔류.②각조세포적생장、분화화증식정황도치상차현미경관찰:3조세포여탈세포기질골재료복합배양12 h후,세포재각조재료표면화공극내균가점부화생장.③조직학관찰:MASSON염색현시3조세포재재료표면화공극내대량증식,병분비세포외기질.이성골세포+혈관내피세포조재료표면점부적세포수량최다.조직학절편염색현시,각조세포연재료변연긴밀부착,세포여재료적조직상용성량호.④각조세포점부、생장、증식화기질분비정황소묘전경관찰:3조세포여재료복합배양5 d후,세포긴밀점부재재료표면.성골세포정사형혹다각형,상린세포간유돌기상호련접.혈관내피세포정타원형,유각상돌기,여재료부착긴밀.기중,성골세포+혈관내피세포조재료표면점부대량세포,병유교다효원형성.혈관내피세포조재료표면효원형성흔소.⑤세포주기화DNA함량:성골세포+혈관내피세포조1 d,3 d DNA합성기고우단독세포조,무이배체세포.결론:탈세포기질골구유량호적생물상용성、겁저적항원성、무세포독성화치류성.성골세포여혈관내피세포연합배양세포재탈세포기질이충골중유흔강적증식잠력.
