现代生物医学进展
現代生物醫學進展
현대생물의학진전
PROGRESS IN MODERN BIOMEDICINE
2008年
6期
1081-1084
,共4页
张晓%葛银林%侯琳%薛美兰
張曉%葛銀林%侯琳%薛美蘭
장효%갈은림%후림%설미란
siRNA%基因%c-myc%HeLA细胞
siRNA%基因%c-myc%HeLA細胞
siRNA%기인%c-myc%HeLA세포
目的:利用siRNA(small interference RNA)技术研究c-myc基因的对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响.方法:依据Promega公司在网上提供的设计软件,设计针对c-myc基因的siRNA,合成DNA模板,体外转录合成siRNA.通过阳离子聚合物jet-SITM-ENDO将合成的siRNA转染入HeLa细胞,以未转染细胞以及错义序列siRNA-scr转染细胞为对照.用细胞计数法检测siRNA对HeLa细胞增殖的影响.流式细胞法检测细胞周期及蛋白表达的变化,RT-PCR法比较转染前后c-myc mRNA表达水平的变化.结果:细胞计数法结果显示,转染24h后c-myc基因siRNA明显抑制MCF-7细胞增殖,转染48h后,抑制效率稳定.c-myc基因siRNA转染后能有效地抑制HeLa细胞的增殖,阻滞细胞周期于G0/G1期,siRNA转染组c-myc mRNA、蛋白的表达量明显低于空白对照组、错义序列组.结论:体外转录合成的siRNA可有效降低HeLa细胞c-myc基因的表达,抑制细胞增殖.
目的:利用siRNA(small interference RNA)技術研究c-myc基因的對宮頸癌HeLa細胞增殖的影響.方法:依據Promega公司在網上提供的設計軟件,設計針對c-myc基因的siRNA,閤成DNA模闆,體外轉錄閤成siRNA.通過暘離子聚閤物jet-SITM-ENDO將閤成的siRNA轉染入HeLa細胞,以未轉染細胞以及錯義序列siRNA-scr轉染細胞為對照.用細胞計數法檢測siRNA對HeLa細胞增殖的影響.流式細胞法檢測細胞週期及蛋白錶達的變化,RT-PCR法比較轉染前後c-myc mRNA錶達水平的變化.結果:細胞計數法結果顯示,轉染24h後c-myc基因siRNA明顯抑製MCF-7細胞增殖,轉染48h後,抑製效率穩定.c-myc基因siRNA轉染後能有效地抑製HeLa細胞的增殖,阻滯細胞週期于G0/G1期,siRNA轉染組c-myc mRNA、蛋白的錶達量明顯低于空白對照組、錯義序列組.結論:體外轉錄閤成的siRNA可有效降低HeLa細胞c-myc基因的錶達,抑製細胞增殖.
목적:이용siRNA(small interference RNA)기술연구c-myc기인적대궁경암HeLa세포증식적영향.방법:의거Promega공사재망상제공적설계연건,설계침대c-myc기인적siRNA,합성DNA모판,체외전록합성siRNA.통과양리자취합물jet-SITM-ENDO장합성적siRNA전염입HeLa세포,이미전염세포이급착의서렬siRNA-scr전염세포위대조.용세포계수법검측siRNA대HeLa세포증식적영향.류식세포법검측세포주기급단백표체적변화,RT-PCR법비교전염전후c-myc mRNA표체수평적변화.결과:세포계수법결과현시,전염24h후c-myc기인siRNA명현억제MCF-7세포증식,전염48h후,억제효솔은정.c-myc기인siRNA전염후능유효지억제HeLa세포적증식,조체세포주기우G0/G1기,siRNA전염조c-myc mRNA、단백적표체량명현저우공백대조조、착의서렬조.결론:체외전록합성적siRNA가유효강저HeLa세포c-myc기인적표체,억제세포증식.
