CAJ | 학술논문

表皮生长因子受体由于在许多种肿瘤细胞表面过度表达而成为特异杀伤肿瘤细胞的理想靶位;正电性抗菌肽有独特的膜毒性细胞毒机制.研究以小鼠(Mus musculus)表皮生长因子(mouse epidermal growth factor,MEOF)为导向部分,以蜂毒溶血肽(melittin,Mel)为毒性部分,构建特异杀伤肿瘤细胞的膜毒性免疫毒素MEGFMEL嵌合蛋白.该嵌合蛋白以大肠杆菌(Eschedchia coil)BL21为表达宿主,以pET30a为表达载体,采用低温诱导表达和无破胞程序的冻融法进行纯化,最终浓度为63.45μg/Ml、纯度为68%.体外活性检测表明,MEGFMEL嵌合蛋白对表面过度表达EGFR的肝癌A431细胞表现出显著杀伤力,其LD50为52.6μg/Ml.结果显示以正电性抗菌肽为毒性部分构建针对表皮生长因子受体的新型膜毒性免疫毒素(im-munotoxin,IT)是可行的.
표피생장인자수체유우재허다충종류세포표면과도표체이성위특이살상종류세포적이상파위;정전성항균태유독특적막독성세포독궤제.연구이소서(Mus musculus)표피생장인자(mouse epidermal growth factor,MEOF)위도향부분,이봉독용혈태(melittin,Mel)위독성부분,구건특이살상종류세포적막독성면역독소MEGFMEL감합단백.해감합단백이대장간균(Eschedchia coil)BL21위표체숙주,이pET30a위표체재체,채용저온유도표체화무파포정서적동융법진행순화,최종농도위63.45μg/Ml、순도위68%.체외활성검측표명,MEGFMEL감합단백대표면과도표체EGFR적간암A431세포표현출현저살상력,기LD50위52.6μg/Ml.결과현시이정전성항균태위독성부분구건침대표피생장인자수체적신형막독성면역독소(im-munotoxin,IT)시가행적.