CAJ | 학술논문

F18大肠杆菌黏附素受体结合域鉴定新方法
F18대장간균점부소수체결합역감정신방법
A novel identification method of the receptor-binding domain for FedF from pathogenic F18 fimbrial Escherichia coli

万方数据

扬州大学学报（农业与生命科学版） 양주대학학보（농업여생명과학판）
JOURNAL OF YANGZHOU UNIVERSITY(AGRICULTURAL AND LIFE SCIENCE EDITION)
2010年 2期 1-5 ,共5页

葛兆宏%陆广富%朱军%郁磊%羊扬%原志伟%朱吕昌%吴圣龙%包文斌%朱国强

갈조굉%륙엄부%주군%욱뢰%양양%원지위%주려창%오골룡%포문빈%주국강

F18大肠杆菌%黏附素FedF%V型分泌系统%自主转运蛋白%受体结合域 F18大腸桿菌%黏附素FedF%V型分泌繫統%自主轉運蛋白%受體結閤域
F18대장간균%점부소FedF%V형분비계통%자주전운단백%수체결합역

运用DNA重组技术将F18ab和F18ac大肠杆菌黏附素fedF亚单位内的第60～109位氨基酸残基区段(fedF1)和fedF全基因克隆人V型分泌系统MisL的载客结构域上,经DNA测序确证其正确阅读框后,含重组菌质粒pnirBMisL-fedF或pnirBMisL-fedF1经厌氧诱导后,与断奶仔猪小肠上皮细胞进行体外黏附试验.结果表明:FUT1基因M307位点中GG型和AG型仔猪小肠上皮细胞均能黏附上述重组菌,而AA型个体小肠上皮细胞则不能黏附.上述重组菌均能与兔抗F18ab菌毛FedF亚单位单因子高免血清发生玻板凝集反应.而FedF突变体FedF(M)的重组质粒菌则失去上述凝集和黏附特性.证明F18大肠杆菌黏附素fedF基因及其基因片段fedF1在大肠杆菌表面得到了功能性表达,F18ab和F18ac黏附素FedF直接介导F18大肠杆菌与易感仔猪小肠上皮细胞表面大分子受体黏附结合,fedF1为黏附素FedF的受体主要结合域,其His88、His99是FedF黏附素受体结合域的重要氨基酸残基.
운용DNA중조기술장F18ab화F18ac대장간균점부소fedF아단위내적제60～109위안기산잔기구단(fedF1)화fedF전기인극륭인V형분비계통MisL적재객결구역상,경DNA측서학증기정학열독광후,함중조균질립pnirBMisL-fedF혹pnirBMisL-fedF1경염양유도후,여단내자저소장상피세포진행체외점부시험.결과표명:FUT1기인M307위점중GG형화AG형자저소장상피세포균능점부상술중조균,이AA형개체소장상피세포칙불능점부.상술중조균균능여토항F18ab균모FedF아단위단인자고면혈청발생파판응집반응.이FedF돌변체FedF(M)적중조질립균칙실거상술응집화점부특성.증명F18대장간균점부소fedF기인급기기인편단fedF1재대장간균표면득도료공능성표체,F18ab화F18ac점부소FedF직접개도F18대장간균여역감자저소장상피세포표면대분자수체점부결합,fedF1위점부소FedF적수체주요결합역,기His88、His99시FedF점부소수체결합역적중요안기산잔기.