中国水产科学
中國水產科學
중국수산과학
Journal of Fishery Sciences of China
2010年
4期
619-629
,共11页
王嘉%马洪明%麦康森%张文兵%刘付志国
王嘉%馬洪明%麥康森%張文兵%劉付誌國
왕가%마홍명%맥강삼%장문병%류부지국
皱纹盘鲍%肝胰腺%肾脏%维生素C%抑制消减杂交%消减cDNA文库
皺紋盤鮑%肝胰腺%腎髒%維生素C%抑製消減雜交%消減cDNA文庫
추문반포%간이선%신장%유생소C%억제소감잡교%소감cDNA문고
采用抑制消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)技术研究皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai Ino.)Vc缺乏诱导的差异表达基因.实验用皱纹盘鲍成鲍初始体质量为(74.32±0.43)g,初始壳长为(84.36±0.24)mm.配制了Vc缺乏(0.0 mg/kg)和高剂量添加(4 967.5 mg/kg)2个水平的人工饲料进行饲喂.经过170d的养殖后,分别构建肝胰腺和肾脏Vc缺乏消减cDNA文库.消减杂交效率分析显示,差异表达的基因分别被富集了大约25和25~210倍.从两个文库中随机挑选阳性克隆进行测序.在肝胰腺消减cDNA文库中获得63个片段,其中已知功能基因占54.0%,Gene ontology(GO)按照功能将其分为4类:代谢相关基因占15.9%,细胞代谢相关基因占30.2%.生物调节相关基因占4.8%,其他功能基因占3.2%.未知功能基因占46.0%.在肾脏消减cDNA文库中获得39个片段,其中已知功能基因占53.8%,GO将其分为3类:代谢相关基因占5.1%,细胞代谢相关基因占28.2%,生物调节相关基因占20.5%.未知功能基因占46.2%.其中,获得了包括细胞色素c氧化酶、葡萄糖-1脱氢酶、α-葡萄糖苷酶、β-1,3-D-葡聚糖酶、纤维素酶、藻酸盐裂解酶以及铁蛋白等在其他动物中被证明与Vc合成相关的基因,为进一步研究皱纹盘鲍Vc的合成和代谢奠定了基础.
採用抑製消減雜交(suppression subtractive hybridization,SSH)技術研究皺紋盤鮑(Haliotis discus hannai Ino.)Vc缺乏誘導的差異錶達基因.實驗用皺紋盤鮑成鮑初始體質量為(74.32±0.43)g,初始殼長為(84.36±0.24)mm.配製瞭Vc缺乏(0.0 mg/kg)和高劑量添加(4 967.5 mg/kg)2箇水平的人工飼料進行飼餵.經過170d的養殖後,分彆構建肝胰腺和腎髒Vc缺乏消減cDNA文庫.消減雜交效率分析顯示,差異錶達的基因分彆被富集瞭大約25和25~210倍.從兩箇文庫中隨機挑選暘性剋隆進行測序.在肝胰腺消減cDNA文庫中穫得63箇片段,其中已知功能基因佔54.0%,Gene ontology(GO)按照功能將其分為4類:代謝相關基因佔15.9%,細胞代謝相關基因佔30.2%.生物調節相關基因佔4.8%,其他功能基因佔3.2%.未知功能基因佔46.0%.在腎髒消減cDNA文庫中穫得39箇片段,其中已知功能基因佔53.8%,GO將其分為3類:代謝相關基因佔5.1%,細胞代謝相關基因佔28.2%,生物調節相關基因佔20.5%.未知功能基因佔46.2%.其中,穫得瞭包括細胞色素c氧化酶、葡萄糖-1脫氫酶、α-葡萄糖苷酶、β-1,3-D-葡聚糖酶、纖維素酶、藻痠鹽裂解酶以及鐵蛋白等在其他動物中被證明與Vc閤成相關的基因,為進一步研究皺紋盤鮑Vc的閤成和代謝奠定瞭基礎.
채용억제소감잡교(suppression subtractive hybridization,SSH)기술연구추문반포(Haliotis discus hannai Ino.)Vc결핍유도적차이표체기인.실험용추문반포성포초시체질량위(74.32±0.43)g,초시각장위(84.36±0.24)mm.배제료Vc결핍(0.0 mg/kg)화고제량첨가(4 967.5 mg/kg)2개수평적인공사료진행사위.경과170d적양식후,분별구건간이선화신장Vc결핍소감cDNA문고.소감잡교효솔분석현시,차이표체적기인분별피부집료대약25화25~210배.종량개문고중수궤도선양성극륭진행측서.재간이선소감cDNA문고중획득63개편단,기중이지공능기인점54.0%,Gene ontology(GO)안조공능장기분위4류:대사상관기인점15.9%,세포대사상관기인점30.2%.생물조절상관기인점4.8%,기타공능기인점3.2%.미지공능기인점46.0%.재신장소감cDNA문고중획득39개편단,기중이지공능기인점53.8%,GO장기분위3류:대사상관기인점5.1%,세포대사상관기인점28.2%,생물조절상관기인점20.5%.미지공능기인점46.2%.기중,획득료포괄세포색소c양화매、포도당-1탈경매、α-포도당감매、β-1,3-D-포취당매、섬유소매、조산염렬해매이급철단백등재기타동물중피증명여Vc합성상관적기인,위진일보연구추문반포Vc적합성화대사전정료기출.