中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2010年
19期
3421-3426
,共6页
冯进益%尤元璋%李偏%蔡志刚%芮钢
馮進益%尤元璋%李偏%蔡誌剛%芮鋼
풍진익%우원장%리편%채지강%예강
细胞示踪%BrdU%骨髓间充质干细胞%组织工程%Real Time-PCR
細胞示蹤%BrdU%骨髓間充質榦細胞%組織工程%Real Time-PCR
세포시종%BrdU%골수간충질간세포%조직공정%Real Time-PCR
背景:BrdU标记是一种标记率高、标记简便的标记物,但其毒性报道不一.目的:观察BrdU标记对SD大鼠骨髓间充质千细胞增殖与成骨能力的影响.方法:直接贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,0.2%Brdu标记后检测其增殖能力、克隆形成能力;经成骨诱导液诱导培养3周后,利用茜素红染色,荧光免疫组织化学和RT-PCR观测标记前后骨髓间充质干细胞成骨能力的变化情况.结果与结论:Brdu标记后骨髓间充质干细胞克隆形成能力明显减弱,在克隆个数和面积上均小于正常对照组(P<0.05);在增殖能力方面,BrdU标记后第4天开始进入对数增长期时增殖较慢,高峰较低(P<0.05);在成骨能力方面,经成骨诱导后BrdU标记组与正常对照组的骨髓间充质千细胞均表达骨钙素、Ⅰ型胶原,并且都有明显的钙结节形成,RT-PCR检测显示标记前后骨髓间充质干细胞在骨钙索基因的表达方面差异无显著性意义(P>0.05).提示BrdU标记抑制骨髓间充质干细胞的克隆增殖形成能力,但不会降低其成骨分化能力,可以广泛应用于骨髓间充质干细胞作为种子细胞干细胞研究的示踪剂.
揹景:BrdU標記是一種標記率高、標記簡便的標記物,但其毒性報道不一.目的:觀察BrdU標記對SD大鼠骨髓間充質韆細胞增殖與成骨能力的影響.方法:直接貼壁法分離培養大鼠骨髓間充質榦細胞,0.2%Brdu標記後檢測其增殖能力、剋隆形成能力;經成骨誘導液誘導培養3週後,利用茜素紅染色,熒光免疫組織化學和RT-PCR觀測標記前後骨髓間充質榦細胞成骨能力的變化情況.結果與結論:Brdu標記後骨髓間充質榦細胞剋隆形成能力明顯減弱,在剋隆箇數和麵積上均小于正常對照組(P<0.05);在增殖能力方麵,BrdU標記後第4天開始進入對數增長期時增殖較慢,高峰較低(P<0.05);在成骨能力方麵,經成骨誘導後BrdU標記組與正常對照組的骨髓間充質韆細胞均錶達骨鈣素、Ⅰ型膠原,併且都有明顯的鈣結節形成,RT-PCR檢測顯示標記前後骨髓間充質榦細胞在骨鈣索基因的錶達方麵差異無顯著性意義(P>0.05).提示BrdU標記抑製骨髓間充質榦細胞的剋隆增殖形成能力,但不會降低其成骨分化能力,可以廣汎應用于骨髓間充質榦細胞作為種子細胞榦細胞研究的示蹤劑.
배경:BrdU표기시일충표기솔고、표기간편적표기물,단기독성보도불일.목적:관찰BrdU표기대SD대서골수간충질천세포증식여성골능력적영향.방법:직접첩벽법분리배양대서골수간충질간세포,0.2%Brdu표기후검측기증식능력、극륭형성능력;경성골유도액유도배양3주후,이용천소홍염색,형광면역조직화학화RT-PCR관측표기전후골수간충질간세포성골능력적변화정황.결과여결론:Brdu표기후골수간충질간세포극륭형성능력명현감약,재극륭개수화면적상균소우정상대조조(P<0.05);재증식능력방면,BrdU표기후제4천개시진입대수증장기시증식교만,고봉교저(P<0.05);재성골능력방면,경성골유도후BrdU표기조여정상대조조적골수간충질천세포균표체골개소、Ⅰ형효원,병차도유명현적개결절형성,RT-PCR검측현시표기전후골수간충질간세포재골개색기인적표체방면차이무현저성의의(P>0.05).제시BrdU표기억제골수간충질간세포적극륭증식형성능력,단불회강저기성골분화능력,가이엄범응용우골수간충질간세포작위충자세포간세포연구적시종제.
