中国医学科学院学报
中國醫學科學院學報
중국의학과학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE SINICAE
2012年
1期
19-24
,共6页
CD34+CD38-Lin-细胞%Shh%BMP-4%Jagged-1%自我更新%增殖%微环境
CD34+CD38-Lin-細胞%Shh%BMP-4%Jagged-1%自我更新%增殖%微環境
CD34+CD38-Lin-세포%Shh%BMP-4%Jagged-1%자아경신%증식%미배경
目的 探讨单个CD34+CD38-Lin-细胞在体外培养体系中的生存和增殖能力.方法 用免疫磁珠从脐带血单个核细胞中分选出Lin-细胞,然后用流式细胞仪筛选出CD34+CD38-Lin-细胞,并由流式细胞仪将单个CD34+CD38 - Lin -细胞直接放入培养孔中进行培养.培养基中分别加细胞因子Shh、BMP-4或Jagged-1作为实验组,未加细胞因子的以等量PBS作为对照.应用细胞计数法、集落培养计数法检测不同培养条件下各组细胞数量的变化及集落形成能力的差异.结果 培养第3天,各组均能见到单个细胞的分裂倍增现象.培养1周后,各实验组的细胞存活率均高于对照组,顺序为Jagged-1组＞BMP-4组＞Shh组＞对照组,而每孔细胞数的顺序为Jagged-1组＞BMP-4组＞对照组；实验组中每孔细胞数为0的孔数明显低于对照组,尤其是Jagged-1组,而实验组每孔细胞数多于17的孔数高于对照组,其中BMP-4组最高.实验组的每孔集落数明显高于对照组,实验组之间的差异并不明显.另外,单个细胞集落培养后能形成红系爆式集落及粒细胞、单核细胞、粒-单核细胞集落形成单位等各式集落.结论 单个CD34+CD38-Lin-细胞能够单独完成生存、自我更新及增殖等过程,而添加细胞因子Shh、BMP-4、Jagged-1能够增强其上述能力,显示微环境的重要性.单个CD34+CD38-Lin-细胞只能形成一种细胞集落,说明微环境对于维持CD34+CD38-Lin-细胞群的全能性必不可少.
目的 探討單箇CD34+CD38-Lin-細胞在體外培養體繫中的生存和增殖能力.方法 用免疫磁珠從臍帶血單箇覈細胞中分選齣Lin-細胞,然後用流式細胞儀篩選齣CD34+CD38-Lin-細胞,併由流式細胞儀將單箇CD34+CD38 - Lin -細胞直接放入培養孔中進行培養.培養基中分彆加細胞因子Shh、BMP-4或Jagged-1作為實驗組,未加細胞因子的以等量PBS作為對照.應用細胞計數法、集落培養計數法檢測不同培養條件下各組細胞數量的變化及集落形成能力的差異.結果 培養第3天,各組均能見到單箇細胞的分裂倍增現象.培養1週後,各實驗組的細胞存活率均高于對照組,順序為Jagged-1組＞BMP-4組＞Shh組＞對照組,而每孔細胞數的順序為Jagged-1組＞BMP-4組＞對照組；實驗組中每孔細胞數為0的孔數明顯低于對照組,尤其是Jagged-1組,而實驗組每孔細胞數多于17的孔數高于對照組,其中BMP-4組最高.實驗組的每孔集落數明顯高于對照組,實驗組之間的差異併不明顯.另外,單箇細胞集落培養後能形成紅繫爆式集落及粒細胞、單覈細胞、粒-單覈細胞集落形成單位等各式集落.結論 單箇CD34+CD38-Lin-細胞能夠單獨完成生存、自我更新及增殖等過程,而添加細胞因子Shh、BMP-4、Jagged-1能夠增彊其上述能力,顯示微環境的重要性.單箇CD34+CD38-Lin-細胞隻能形成一種細胞集落,說明微環境對于維持CD34+CD38-Lin-細胞群的全能性必不可少.
목적 탐토단개CD34+CD38-Lin-세포재체외배양체계중적생존화증식능력.방법 용면역자주종제대혈단개핵세포중분선출Lin-세포,연후용류식세포의사선출CD34+CD38-Lin-세포,병유류식세포의장단개CD34+CD38 - Lin -세포직접방입배양공중진행배양.배양기중분별가세포인자Shh、BMP-4혹Jagged-1작위실험조,미가세포인자적이등량PBS작위대조.응용세포계수법、집락배양계수법검측불동배양조건하각조세포수량적변화급집락형성능력적차이.결과 배양제3천,각조균능견도단개세포적분렬배증현상.배양1주후,각실험조적세포존활솔균고우대조조,순서위Jagged-1조＞BMP-4조＞Shh조＞대조조,이매공세포수적순서위Jagged-1조＞BMP-4조＞대조조；실험조중매공세포수위0적공수명현저우대조조,우기시Jagged-1조,이실험조매공세포수다우17적공수고우대조조,기중BMP-4조최고.실험조적매공집락수명현고우대조조,실험조지간적차이병불명현.령외,단개세포집락배양후능형성홍계폭식집락급립세포、단핵세포、립-단핵세포집락형성단위등각식집락.결론 단개CD34+CD38-Lin-세포능구단독완성생존、자아경신급증식등과정,이첨가세포인자Shh、BMP-4、Jagged-1능구증강기상술능력,현시미배경적중요성.단개CD34+CD38-Lin-세포지능형성일충세포집락,설명미배경대우유지CD34+CD38-Lin-세포군적전능성필불가소.
