军事医学科学院院刊
軍事醫學科學院院刊
군사의학과학원원간
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2004年
4期
326-328,332
,共4页
常会波%刘云%吴建新%徐琪寿
常會波%劉雲%吳建新%徐琪壽
상회파%류운%오건신%서기수
脱氢奎尼酸合成酶%aroB基因%大肠杆菌%基因表达
脫氫奎尼痠閤成酶%aroB基因%大腸桿菌%基因錶達
탈경규니산합성매%aroB기인%대장간균%기인표체
目的: 克隆表达大肠杆菌脱氢奎尼酸合成酶基因aroB,并测定其生物学活性.方法: 根据大肠杆菌中aroB基因的序列设计了一对引物,利用PCR技术扩增得到aroB基因,将其克隆入pGEM-Teasy载体中,以双脱氧法进行测序,然后再克隆入高效原核表达载体pBV220,对该重组子的SD序列进行调节后利用温度诱导表达,并测酶的生物活性.结果: 构建了aroB基因的克隆和表达重组子,经SD序列调节后,aroB基因获得高效表达,SDS-PAGE图谱显示新增38.8×103蛋白带,酶活性测定结果表明脱氢奎尼酸合成酶的相对酶活性为5.4.结论: 实现了脱氢奎尼酸合成酶基因在大肠杆菌中的高效表达,为构建产脱氢奎尼酸工程菌种奠定了基础.
目的: 剋隆錶達大腸桿菌脫氫奎尼痠閤成酶基因aroB,併測定其生物學活性.方法: 根據大腸桿菌中aroB基因的序列設計瞭一對引物,利用PCR技術擴增得到aroB基因,將其剋隆入pGEM-Teasy載體中,以雙脫氧法進行測序,然後再剋隆入高效原覈錶達載體pBV220,對該重組子的SD序列進行調節後利用溫度誘導錶達,併測酶的生物活性.結果: 構建瞭aroB基因的剋隆和錶達重組子,經SD序列調節後,aroB基因穫得高效錶達,SDS-PAGE圖譜顯示新增38.8×103蛋白帶,酶活性測定結果錶明脫氫奎尼痠閤成酶的相對酶活性為5.4.結論: 實現瞭脫氫奎尼痠閤成酶基因在大腸桿菌中的高效錶達,為構建產脫氫奎尼痠工程菌種奠定瞭基礎.
목적: 극륭표체대장간균탈경규니산합성매기인aroB,병측정기생물학활성.방법: 근거대장간균중aroB기인적서렬설계료일대인물,이용PCR기술확증득도aroB기인,장기극륭입pGEM-Teasy재체중,이쌍탈양법진행측서,연후재극륭입고효원핵표체재체pBV220,대해중조자적SD서렬진행조절후이용온도유도표체,병측매적생물활성.결과: 구건료aroB기인적극륭화표체중조자,경SD서렬조절후,aroB기인획득고효표체,SDS-PAGE도보현시신증38.8×103단백대,매활성측정결과표명탈경규니산합성매적상대매활성위5.4.결론: 실현료탈경규니산합성매기인재대장간균중적고효표체,위구건산탈경규니산공정균충전정료기출.
