河南农业科学
河南農業科學
하남농업과학
JOURNAL OF HENAN AGRICULTURAL SCIENCES
2007年
6期
118-121
,共4页
禽流感病毒%HA基因%克隆%序列分析
禽流感病毒%HA基因%剋隆%序列分析
금류감병독%HA기인%극륭%서렬분석
采用异硫氰酸胍法提取禽流感病毒分离株的SPF鸡胚尿囊毒RNA,利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术扩增出禽流感病毒A/chicken/Zhuhai/154/03(H9N2)的8个基因片段(HA,NA,M,NP,NS,PA,PB1,PB2).然后将其克隆到线状克隆载体pGEM-Teasy vector后进行序列测定和拼接,并将克隆到的8个基因片段与其他禽流感病毒毒株(A/Chicken/Guangdong/SS/94,A/Swine/Hong Kong/9/98-MA,A/Chicken/Shanghai/F/98,A/Duck/Hong Kong/Y439/97,A/Quail/Hong Kong/G1/97,A/Chicken/Shanghai/4/01)各个基因的相应序列进行比较分析.结果表明:克隆到的A/chicken/Zhuhai/154/03(AZH154)株的8个基因片段均含有相应病毒基因的完整开放阅读框架:AZH154的各基因与A/Chicken/Guangdong/SS/94株相应各基因同源性最高(NS基因除外,同源性只有67.5%),与A/Chicken/Shanghai/4/01各基因同源性高于A/Swine/HongKong/9/98-MA,A/Duck/Hong Kong/Y439/97和A/Chicken/Shanghai/F/98各基因同源性.所克隆的基因为禽流感病毒HA基因芯片的研究奠定了基础,同时为诊断和预防禽流感(AI)提供了科学依据.
採用異硫氰痠胍法提取禽流感病毒分離株的SPF鷄胚尿囊毒RNA,利用反轉錄-聚閤酶鏈式反應(RT-PCR)技術擴增齣禽流感病毒A/chicken/Zhuhai/154/03(H9N2)的8箇基因片段(HA,NA,M,NP,NS,PA,PB1,PB2).然後將其剋隆到線狀剋隆載體pGEM-Teasy vector後進行序列測定和拼接,併將剋隆到的8箇基因片段與其他禽流感病毒毒株(A/Chicken/Guangdong/SS/94,A/Swine/Hong Kong/9/98-MA,A/Chicken/Shanghai/F/98,A/Duck/Hong Kong/Y439/97,A/Quail/Hong Kong/G1/97,A/Chicken/Shanghai/4/01)各箇基因的相應序列進行比較分析.結果錶明:剋隆到的A/chicken/Zhuhai/154/03(AZH154)株的8箇基因片段均含有相應病毒基因的完整開放閱讀框架:AZH154的各基因與A/Chicken/Guangdong/SS/94株相應各基因同源性最高(NS基因除外,同源性隻有67.5%),與A/Chicken/Shanghai/4/01各基因同源性高于A/Swine/HongKong/9/98-MA,A/Duck/Hong Kong/Y439/97和A/Chicken/Shanghai/F/98各基因同源性.所剋隆的基因為禽流感病毒HA基因芯片的研究奠定瞭基礎,同時為診斷和預防禽流感(AI)提供瞭科學依據.
채용이류청산고법제취금류감병독분리주적SPF계배뇨낭독RNA,이용반전록-취합매련식반응(RT-PCR)기술확증출금류감병독A/chicken/Zhuhai/154/03(H9N2)적8개기인편단(HA,NA,M,NP,NS,PA,PB1,PB2).연후장기극륭도선상극륭재체pGEM-Teasy vector후진행서렬측정화병접,병장극륭도적8개기인편단여기타금류감병독독주(A/Chicken/Guangdong/SS/94,A/Swine/Hong Kong/9/98-MA,A/Chicken/Shanghai/F/98,A/Duck/Hong Kong/Y439/97,A/Quail/Hong Kong/G1/97,A/Chicken/Shanghai/4/01)각개기인적상응서렬진행비교분석.결과표명:극륭도적A/chicken/Zhuhai/154/03(AZH154)주적8개기인편단균함유상응병독기인적완정개방열독광가:AZH154적각기인여A/Chicken/Guangdong/SS/94주상응각기인동원성최고(NS기인제외,동원성지유67.5%),여A/Chicken/Shanghai/4/01각기인동원성고우A/Swine/HongKong/9/98-MA,A/Duck/Hong Kong/Y439/97화A/Chicken/Shanghai/F/98각기인동원성.소극륭적기인위금류감병독HA기인심편적연구전정료기출,동시위진단화예방금류감(AI)제공료과학의거.
