CAJ | 학술논문

目的制备并筛选出高特异性高活性的抗01群稻叶型霍乱弧菌(Vibrio cholerae O1 Serotype Inaba)单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb),为霍乱的预防诊断提供有力的抗体工具.方法应用杂交瘤技术,通过火活的O1群稻叶型霍乱弧菌免疫的BALB/c小鼠的脾细胞与SP2/0细胞融合制备特异性McAb,以间接ELISA法对所需的杂交瘤细胞株进行了特异性及排除性筛选,对筛选出的特异性McAb进行了包括亚型鉴定,效价、亲和常数的测定以及特异性的鉴定与分析,并通过单克隆抗体的位点相加实验、与O1群稻叶型霍乱弧菌脂多糖(LPS)的间接ELISA和Western blot实验对McAb识别的抗原表位进行了初步分析.结果融合了386株能分泌抗O1群稻叶型霍乱弧菌McAb的杂交瘤细胞株,通过用O1群小川型、O139霍乱弧菌及9种非霍乱弧菌的细菌进行的筛选,最后得到4株能稳定分泌特异性的针对该McAb的细胞株,其分泌的抗体业类分别为2株IgG1,1株IgG2a,1株IgG2b;腹水效价均达10～;亲和常数达108以上.问接ELISA法及Western blot证实所获的McAb可与O1群稻叶型霍乱弧菌发生特异性反应.ELISA相加实验结果显示4株McAb识别不同的抗原表位,与LPS的反应表明其中2株针对O1群稻叶型霍乱弧菌脂多糖,2株针对非脂多糖抗原位点.结论获得霍乱弧菌O1群稻叶型特异性McAb,初步定位单克隆抗体识别表位所在区域.
목적 제비병사선출고특이성고활성적항01군도협형곽란호균(Vibrio cholerae O1 Serotype Inaba)단극륭항체(monoclonal antibody,McAb),위곽란적예방진단제공유력적항체공구.방법 응용잡교류기술,통과화활적O1군도협형곽란호균면역적BALB/c소서적비세포여SP2/0세포융합제비특이성McAb,이간접ELISA법대소수적잡교류세포주진행료특이성급배제성사선,대사선출적특이성McAb진행료포괄아형감정,효개、친화상수적측정이급특이성적감정여분석,병통과단극륭항체적위점상가실험、여O1군도협형곽란호균지다당(LPS)적간접ELISA화Western blot실험대McAb식별적항원표위진행료초보분석.결과 융합료386주능분비항O1군도협형곽란호균McAb적잡교류세포주,통과용O1군소천형、O139곽란호균급9충비곽란호균적세균진행적사선,최후득도4주능은정분비특이성적침대해McAb적세포주,기분비적항체업류분별위2주IgG1,1주IgG2a,1주IgG2b;복수효개균체10～;친화상수체108이상.문접ELISA법급Western blot증실소획적McAb가여O1군도협형곽란호균발생특이성반응.ELISA상가실험결과현시4주McAb식별불동적항원표위,여LPS적반응표명기중2주침대O1군도협형곽란호균지다당,2주침대비지다당항원위점.결론 획득곽란호균O1군도협형특이성McAb,초보정위단극륭항체식별표위소재구역.